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楼主: 倒腾细胞
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低糖DMEM+FBS10%培养SD大鼠MSC,P0和P1代消化不下来啊很吃力。   [复制链接]

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发表于 2014-8-27 09:21 |只看该作者
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7 F! Z7 T8 ^+ I  B- [, l& Z$ _
3 V# W3 O. E: p3 K+ Q! l& f" I3 @% d原代取材的细胞状态是否良好,有很多问题需要注意的,比如个体差异性,动物的年龄,原代取材时候组织杂质的去除,原代细胞接种密度,再就是培养体系,一般采用的是LD+10%FBS,但是FBS最好选用专用于干细胞的,这样可以缩短培养传代和纯化的时间
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发表于 2014-8-27 14:32 |只看该作者
回复 cyagen 的帖子
2 I: m( B" P: Z; D( X
! |# U: F+ A" l  H5 d, p今天消化P3代细胞 很顺利 好神奇 貌似操作跟之前都是一样的呀 另外请问下前辈专门用于干细胞培养的血清具体指什么?我们用的Gibco(北美), 经费非常有限太贵用不起呀
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发表于 2014-8-28 17:01 |只看该作者
回复 倒腾细胞 的帖子- Y3 q" e1 Q* n2 L- O! Q

& H* j) R1 X" @- K% e大鼠MSC经过传代会逐渐纯化的,另外可能也跟胰酶的效价有关,我们实验室的血清是经过筛选的,选取10种进口血清,然后做克隆形成率的实验,选择一种最适合该种干细胞生长的血清。细胞是否长得好,排除个体差异之外,最重要的就是培养体系了,要是没有那么多经费做血清筛选,只能选择相对来说好一点牌子的FBS了。
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