请教干细胞移植的细胞数量问题

myylovewp

各位前辈好，最近正我在做间充质干细胞移植到小鼠体内，观察其致毒性的实验。我查到文献静脉注射细胞的数量差不多相同，为十万级，也没有数量级别的检测。
: B6 o% R) n* |我想请教的问题是：; W2 Q3 @0 h. k2 p: [( T6 X$ l
1.在细胞移植试验中，为什么没有做数量级别甄选的实验，如果细胞注射量增加1-2个数量级，会出现怎样结果？5 X' t6 |$ I# v0 X: m9 Q, m! Z
2.如果进行细胞移植（小鼠）的安全性评估，那标准化指标有哪些？
6 f4 A9 z& m) A6 J9 D8 W' Q希望各位前辈不吝赐教，小的在这先谢谢各位！

hefan1234

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; Q* ?4 n8 \( e' X1.一般来说都是十万级吧，因为小鼠体重就那么点，打太多它受不了啊，而且一般是用10ml注射器来静脉注射，注射液体积也不会超过10ml，如果增加一两个数量级，先不管它受不受得了，注射液体积肯定要相应加大，你完全可以想象把100ml-1000ml打到这么点大的小鼠身上，怎么打，打多久，会不会打爆了。如果增加一两个数量级细胞，不增加体积，这么浓的细胞很容易结团，一旦形成栓塞，小鼠就OVER了。
+ N3 c- Q, {, s2 V! i# I( r2.一般采用培养一段时间的幼鼠，输注细胞后继续饲养（也可以分次注射），观察实验组与对照组小鼠的白天和晚上的活动状态（是否兴奋好动或者安静不动），饮食情况，体重增加情况，有条件的话还可以抽血做个血检分析，看一下cea含量。一般来说小鼠持续培养一段时间是不会死的（老死，病死不算），如果小鼠突然死了，那就要找一下原因了。

hefan1234

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9 W+ R$ w) e. ~9 R7 [9 f! \8 y回复 myylovewp 的帖子* S$ [. G) V% a4 ^0 s

3 Y7 ?/ s4 y, m& t9 m- C我发现有的实验室用1ml注射器注射的，开始我们也用1ml的，后来采用5ml和10ml的，用小的软针替代原注射器针头，尾静脉缓慢注射（也有看到其他部位注射的），因为注射量比较大，所以回血有点多，一般过一会儿在拔针。如果你用的是1ml的注射器，数量级是10的5次方，可以在实验完成后把实验大致结果告诉我吗，我想知道实验结果差异的原因，谢谢。

myylovewp

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3 s  D/ u0 {: m/ J9 U( ~谢谢您的回复，我还想请教一下您注射后观察的周期是多久？我们采用的是1ml注射器，注射时用200ul PBS重悬细胞。计划这次注射量采用10的5，6，7三个数量级。等有结果后我们交流一下，希望您多多指点。

hefan1234

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7 Z! f4 a* v$ S& W( O& e* k  f' ~0 z4 j  Y6 z
你太客气了，互相交流，大家都有收获，原来我一直以为是细胞太浓结团在小鼠体内形成栓塞导致小鼠死了，现在发现其他实验室的前辈都是1ml体积10的6次方或7次方以上的细胞注射小鼠也没有问题，看来当时小鼠死因可能另有其它。不过当时我们是为了验证细胞和细胞保存液形成的细胞制剂的毒性试验，后来增加注射液体积就没有发生小鼠死亡的状况了，所以就没有深究小鼠死因了。