培养基内毒素超标怎么办？

20084720113

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: W6 P5 T" ~- s2 C; [3 b+ A' @& [3 U
内毒素含量高会不会导致细胞死亡，总觉得培养瓶中漂浮的细胞有点多？注：已做过微生物检测，确定不是污染。

jianglei_sd

一般来说，细胞或组织培养过程中内毒素污染源通常来自于血清、培养液及外加药物配制用水等。内毒素对细胞的影响根据细胞株种类的不同会有所差异，其影响性主要包括一下几方面： 1. 改变细胞外形，如造成肝细胞外形改变并引发其吸收六碳糖的能力降低。 2. 活化细胞，产生讯息传递物质，并影响其下游生物途径反应。如内毒素会活化巨噬细胞使其分泌肿瘤坏死因子(Tumor Necrosis Factor，TNF)、干扰素(Interferon，IFN)，及白细胞介素1(IL-1)等细胞因子，这些细胞因子作用于宿主下丘脑的体温调节中枢，促使体温升高发热。 3. 抑制酵素活性，如血管收缩素转化酶(Angiotensin Converting Enzyme)。 4. 促进或抑制细胞分裂，其效果差异可能与内毒素来源于浓度有关 5. 抑制人工受精 (In Vitro Fertilization) 的卵子受精率。 6. 其他方面：如影响细胞附着力、降低肝细胞对胰岛素(Insulin)结合力、降低细胞钾离子流失等。

cjsbaicai

内毒素0.125EU/ml，还在国家允许范围内吧

deshenglll

回复 20084720113 的帖子  }9 j+ i* l0 _5 z! f$ G

! j3 g, {1 n6 W" S; Y0 i5 r! o培养基做内毒素是会的。你用血浆做内毒素看看。一样也是会超标的。首先厂家出来的培养基一般不会有什么问题的。

deshenglll

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' h" A0 o4 x/ i/ ?% }4 R. Q2 q: I6 O/ l
你都说不是全部了。不同牌子的培养基里面的成分是不一样的。

荷荷

回复 20084720113 的帖子" c+ |: `7 X' F

" Z) A, ]/ b$ @. N* e/ c( V这款培养基确实存在这个问题，不过我也做过实验，细胞悬液清洗两次之后内毒素在正常范围内。看你用途了，如果是用于临床的话还是谨慎些比较好，最好做一些实验观察观察。

CELL007

既然内毒素超标，就换培养基，对细胞培养肯定有影响了，细胞质量也会有影响，一定要慎用啊。你如果做实验也就罢了，用于临床的话，就太不靠谱了

sdwzg119

你内毒素检查的限度定的太严了，0.25EU/ml是合适的，0.125的标准基本上属于很低的限度了；6 F$ }  L/ t6 {/ M- `

- p4 W9 H5 Y3 _" W' a另外不知道你的检查测方法对不对，是不是按照正确的方法做了

sc-cxw

我们做内毒素检测都是将要检测的样品稀释十倍后再进行检测试验的，你是不是没有稀释呀？

日月金帛

不知道你用的是Lonza的哪一款培养基？无血清MSC培养基么？
! q) U$ ^1 ^0 P- |0 C4 n8 @5 O3 \一般来说基础培养基的内毒素含量都是很低的，现在基本上都可以控制在0.03以下，8 Q/ F1 W5 g) Z" ^8 A9 t* ^
但是如果是含有血清、BSA、HSA的培养基，内毒素就会比较高，
6 c/ \# a4 g  J4 p一些厂家的标准一般在0.25或者0.5之下。. U7 v7 g1 c1 r
另外不知道你检测内毒素是用什么方法？有没有事先做干扰实验？有没有做平行？
0 }9 e" e/ v5 h9 K' C; j* k: E8 v检测误差也要考虑进去