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两管FBS都出现了白色杂质,不敢用啊!!! [复制链接]

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楼主
发表于 2014-9-12 10:01 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
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RT,向各位前辈请教一些困惑:
- _! T- Z* V! D, P4 D! ~6 N1、已分别取两管血清(适量)于培养皿,放培养箱。一般是24h后观察有无污染吗?另外这个试验的专业术语怎么说呀?
8 g: x& I& b# C' u* u) a2、血清如果经历反复冻融,是否会出现这种杂质呢?# O0 }' w+ Z  [0 e2 x
3、《解冻后最好一次性用完,如有剩余,4度避光存放,最长可一年。》大家是按这种说法操作吗?
; ~4 H* m0 I5 E9 {1 c7 ^4、我用FBS的时候从负八十度拿出来先放四度,第二天再用。但是第二天没有用完的FBS我就直接丢负八十度冻上了,貌似太不靠谱了吧。
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沙发
发表于 2014-9-12 11:09 |只看该作者
我们也出现过,可以做个无菌检测;白色絮状物可能是血清60度灭活的时候形成的,分装的时候去除就好了,没什么大问题吧;我们分装以后就放在-20度,不进行反复冻融,化了就放4度保存》
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藤椅
发表于 2014-9-12 11:48 |只看该作者
回复 倒腾细胞 的帖子) d: ?$ [2 F3 A7 J3 y

, s7 [7 i0 H5 U$ {5 z2 r# l- ~: m血清一般的都-20度保存,你的应该没事,直接过滤或离心去除就行了。
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板凳
发表于 2014-9-12 12:47 |只看该作者
回复 倒腾细胞 的帖子. r4 ^3 {# E) ^9 y9 e
' H8 ~5 u, d/ c8 e( }
无菌检测的话培养个2-3天就可以看出来是否有污染了,你这应该不是,按楼上所说过滤掉杂质就行了。另外FBS切忌反复冻融,-20保存,分装后的FBS用不完的话就放4度冰箱里就行,不要再冷冻了。
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报纸
发表于 2014-9-12 13:25 |只看该作者
回复 倒腾细胞 的帖子" G' I& P1 l  N  _, I
- d! O$ w5 [( L1 X9 X" e
1.可以延长到72h,或者放于恒温摇床上培养24h后再进行观察。
9 W- v- t7 L" j! G2.冻融后会出现杂质,多为蛋白质沉淀,并无影响,如果心里不安可离心后使用。
1 K: Z7 g2 {0 W/ j; c7 N3.最好的方法是解冻后分装于50ml离心管(或根据平时用量分装)不用的于-20长期保存,短期能用尽的放于4度避光。9 S- T' m! ]* s$ Z% Y4 @' ~, A
4.1~2次冻融没有问题多次就不靠谱了。
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地板
发表于 2014-9-12 19:35 |只看该作者
回复 aochongyu 的帖子
6 H, I( S) P: N5 S2 V% g/ _" k3 e
& N3 h* z+ o) }7 @" B谢前辈 4度里要包下锡箔纸避光吗?

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7楼
发表于 2014-9-12 19:36 |只看该作者
回复 wuzhongqi 的帖子
8 L( }; {; H' o& ?
' V; c) \4 }' L& u恩恩 那就好 最近Gibco的血清都缺货 完全涨价桑不起

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8楼
发表于 2014-9-12 19:36 |只看该作者
回复 fuyinsheng 的帖子
1 w6 ~, Z. x2 e# a6 ^' c4 c
9 N7 q' O3 ~$ Z" l6 I6 L好的 谢谢前辈

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9楼
发表于 2014-9-12 19:37 |只看该作者
回复 cao8194595 的帖子4 b8 F5 Y$ H* a) b2 N
- P7 P" o3 L+ u8 e" E# w* L7 F& G
离心用多少转呢前辈?要锡箔纸包住避光是吧?

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10楼
发表于 2014-9-15 16:07 |只看该作者
白色物质应该不是污染物,可能是蛋白沉淀,和反复冻融关系不大,血清在冷冻时间长了,再融化可能会有那些白色沉淀
+ `$ w. w' i" y! p8 {血清反复冻融次数不要太多,剩余少的话放4度一个月之内用完。
* R# `8 e& w; W
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