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楼主: laoer2004521
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间充质干细胞培养时发现好多黑点和空心的亮点,怎么回事?   [复制链接]

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发表于 2014-10-13 11:28 |只看该作者
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& C( a+ M. Z- [- v: g/ y
% k# d& a# }% l那就是血清的问题了,把血清浓度降点,你现在用多少
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发表于 2014-10-14 14:14 |只看该作者
应该是细胞死亡后碎片吧!不知道你使用什么方法分离的细胞,感觉细胞好杂!建议多培养几代就会好一些!另外中间亮边上黑的圆形亮点有可能是气泡!
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发表于 2014-10-14 15:42 |只看该作者
基本可以确认是细菌污染,你到高倍镜下去看看下黑点是否在运动。
3 k% W- u& Y$ ?9 U& V" l如果是的话,细胞可以考虑直接丢弃。
8 Q8 ^# `5 M- T2 h( v5 U, A  S8 Y
1 C' W- n( w7 I% P$ H& ~* q" |
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发表于 2014-10-14 16:57 |只看该作者
我的上次就直接扔了,心疼死我了
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发表于 2014-11-20 09:47 |只看该作者
首选可以肯定细胞状态很差哦~高倍镜下认真观察那些黑点是否会动?
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发表于 2014-11-20 11:54 |只看该作者
可能是细胞碎片,细胞状态差,建议扔了重做,如果确定前期细胞状态很好,就可能是培养基出问题了。
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发表于 2014-11-20 13:43 |只看该作者
本帖最后由 ceshishua 于 2014-11-20 13:43 编辑 # i- X; w3 u0 A6 n; N1 u

. ^- }& p( z/ J( d& j+ \3 p从细胞形态上来看,表面色泽均一,细胞饱满,应该是状态不错的,只是有点贴壁不牢的感觉,. e: f) [3 [0 o* y  T
再结合你细胞边上的那些黑点和两点,感觉问题主要出在培养皿上,是不是传代的时候没有更换新的培养皿,或是胰酶消化后吹打的不彻底。7 w. Y2 `: v7 v0 i# a5 _
建议在胰酶消化后尽量吹打干净和彻底,测光看一下培养皿底部会变得光滑,这说明上面已经基本没有细胞的残留。另外可以再加入新的培养基之前使用PBS和培养基依次吹打、清理平皿,让细胞传代后有一个干干净净的家,或者直接给他换新家!
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发表于 2014-12-23 13:03 |只看该作者
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1 l; _1 p- W8 h$ [! J- {( ^8 `9 m7 n7 r, ?, e
好像上次北京举行的第三次干细胞医疗大会,有个老师说那些亮的是一些增殖的细胞,至于黑点点感觉好像是污染了吧
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发表于 2015-8-26 08:00 |只看该作者
如果是原代,又没有污染,可用PBS洗2-3次,换液培养看看,如果还是这样,就扔了吧。
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发表于 2015-9-22 12:06 |只看该作者
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- {  {0 Z/ o' Y  J
应该是污染了
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