关于MSC的衰老

倒腾细胞

问下大家 说到者细胞的衰老 大家头疼吗？这问题棘手么？怎么我养的那么容易老呀师兄却朔哪有那么容易老啊

tess1029

细胞老化的人为原因主要有几个：
, i5 {/ P# j' M* P& {# a  N1.接种密度过少，导致细胞增殖缓慢，最后出现老化；' r( m. ?! }- }- R8 U( T  o
2.过度消化，导致细胞损伤；; i( i9 E% j3 c8 b: Z/ c6 q
3.到了合适的汇合度，未及时传代，会因接触抑制导致细胞活力的减弱；
- h. O; ?6 W( ~$ l4.使用适合的血清是预防细胞老化和维持正常生长的保障。

wuxy15

你指的是MSC吗？4 S% w' U8 T  E) {/ [7 z
关于MSC的衰老，我个人认为是这样的：原代细胞都会衰老。0 T2 @, f7 m' U
影响其主要原因：
! G  P- C( `/ ~3 \" u8 p1）细胞量，细胞的倍增代数是有限的。所以原代时的细胞量就很关键。细胞量少和细胞量多同样传代，那基本上先出现衰老一定是细胞量少的那个。! x# Z# V8 \! |+ ]
2）FBS, MSC所用的血清一般是专用的，这些血清是通过测试后挑选出来的。一般对MSC培养更加合适，即不会使细胞提前出现衰老。& ]$ X! d2 S6 L0 V# q; J0 e7 O; G6 t
3）消化。其实每次传代消化都是对细胞一次损伤，MSC对这种损伤会比较敏感。所以有条件请用商业话的酶，如果一定要用Trypsin,请控制好时间和温度。
, S8 {+ \8 V- A- @4) 换液。每次换液时，请将培养液恢复到37度后，再换液。因为MSC对温度也比较敏感，过低的温度也会对细胞早成损伤。

woshibotao_01

个人感觉，老化的原因一个是合适的接种密度，还有就是传代要及时，不能等细胞全长满了再传代。
' `; \2 N. T6 Z' }6 G5 G再有就是培养基中血清的浓度，如果血清浓度过低，也可能使细胞老化过早
: [) P+ R. S7 C! H) b$ M% y' C

dollar007

细胞老化是生命的自然过程、我们通过对过程的控制，可以延缓其老化，但不能绝对避免。' O1 [# m& A& T5 {7 h0 Z. \
在细胞体外培养中，衰老细胞从一开始就存在，随着传代的延续，衰老细胞比例逐渐增高，直至整个细胞群都呈衰老状。
0 Q) T$ q; S7 O  M5 E1 h% d+ O0 y如果我们体外培养过程控制不当，有可能诱导细胞提前衰老。影响因素很多，比如：分离时的化学、机械损伤；传代时的酶损伤；换液时、开培养箱门时冷刺激；不恰当的培养基；不适宜的培养条件，等等。

dollar007

8 }" O% I% ]" E, h3 s- x! n
5 b0 y& N/ h8 v, k
楼上关于合适接种密度的说法，我正好看到一些文献，有另一种观点：有研究者用低密度培养的方法让人类骨髓间充质干细胞迅速扩增，但得到的间充质干细胞会老化并丢失其干细胞特征。Tsai等发现，若在低氧条件下低密度细胞培养，其干细胞特征可得到保留。在低氧条件下，间充质干细胞下传100代后，其端粒长度保持不变、染色体核型正常、基因完整并且无成瘤性。1 O4 B, A4 H: O
Hypoxia inhibits senescence and maintains mesenchymal stem cell properties through down-regulation of E2A-p21 by HIF-TWIST.# q  P! g8 c; S) k0 c
这种观点认为：低密度、低氧条件下培养，可很好维持细胞干性。

fduhoward

接种密度决定了传代时细胞增殖的代数，加大接种密度，减少传代时的融合率。

scarletkiki

低氧状态本身就可以刺激干细胞增殖 不过低氧状态现在用的检测方法有限

sjh15123382094

我想问一下 你是怎么确认细胞衰老的？显微镜下观察吗？
. W, d$ ~4 k1 }' ~我觉得衰老，最主要还是接种密度的问题。融合度85%以上，细胞间会互相挤压，抑制生长，细胞会由原本的舒展的长梭形，变成椭圆，甚至圆点。$ B3 j7 m  E0 K4 l; A) y* H: R* j
所以及时传代是很重要的，给细胞充分的生长空间是必须的，不过接种密度过低，细胞也是会死亡的。

小猪32

建议做一次细胞生长曲线，看看MSC的倍增时限；同时MSC建议在细胞融合率在60%~80%进行传代~