细胞培养，吹散细胞问题

gzeb

公司的免疫细胞培养SOP是4天一补液，可是我以往的工作经验是每天补液和吹散细胞。所以现在这么个培养的话，显微镜下观察细胞，第二天就很多成团，隔上3-4天，基本上底下一层蛮厚的细胞层，所以凭感觉这样不利于细胞生长，而应该要每天吹散细胞。各位帮忙分析下，实在不行自己做个小实验对比下得了

qingxingruyu

一天一吹不累吗，还容易被污染

cjsbaicai

从操作上来说，3-4天补液是比较正常的，每天吹打容易损伤细胞，并使感染风险提高

sdudai

对啊，三四天补液很正常啊，哪有每天都吹打补液的，而且细胞生长没这么快吧。

鸵鸟

初始细胞数目不多的情况下，放在培养瓶中培养，添加相应因子和适量培养基吹打混匀，细胞数目扩增比较多时，就转移到培养袋中培养，根据数目进行补液和因子的添加，不需要吹散

gzeb

回复 cjsbaicai 的帖子2 H4 M; r, b( R; ?

3 M& C7 y- o# e2 o% P) W5 Q污染风险先不考虑，除非实验环境不咋地。3-4天，贴壁细胞培养当然没问题，而且也都是这么做的，免疫细胞培养在第四天之后的生长速度是超快的，一般前3天是不动细胞，之后细胞成团速度很快，需要每天吹散，这是我过往的工作经历，而且我几个同学做免疫细胞培养也是这样操作，细胞损伤方面没出现因为这个而细胞生长不好

lyj-0017

回复 gzeb 的帖子
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个人认为间隔4天补液时间有点长，淋巴类细胞都是悬浮生长，每隔1-2天补液是可以的

chimo100

每天吹散细胞对细胞本身也有一定的机械力的伤害啊？而且也费时费力，没有必要，还是三四天一次补液就可以了。

20084720113

我们培养的细胞也是这样啊，后面基本2天补液，都能看到底部一层白茫茫的细胞，是有些结团的，不过好像也没什么关系吧，晃一晃就好了。不知道你说的“吹散”是怎么“吹”的，感觉操作起来有点麻烦

thor0504

借用一句广告词“喝前摇一摇”~~间隔一两天摇匀一下就差不多了，而且要是进了培养袋的话你还怎么吹啊？