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楼主: sdzhxq
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CIK细胞培养一周死亡   [复制链接]

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优秀会员 帅哥研究员 积极份子

21楼
发表于 2014-11-6 09:39 |只看该作者
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培养基加多了。你试一下加10~20ml培养基...
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22楼
发表于 2014-11-6 09:40 |只看该作者
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3 b/ a  q: p. E) w/ h7 Q: w* P) ^* R5 D% o7 L
CD3的濃度有點髙,50就可以,
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23楼
发表于 2014-11-6 09:42 |只看该作者
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9 b: K) q; ~1 ]3 V/ d/ T* B7 T5 {% u
1.5---2之間 ,試試看看

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24楼
发表于 2014-11-6 10:12 |只看该作者
一开始有聚团是正常现象,LONZA的培养基直接用就可以。有图片上张图片看看,关于接种浓度1.1x 106/ml 是可以的9 x$ g2 ?% z7 P$ z
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25楼
发表于 2014-11-6 10:44 |只看该作者
回复 fenlichong 的帖子
0 p1 w; R. a" f- v# [/ l* }! f. }+ O2 V3 G; b! z$ m0 B: i
PBMC细胞纯度怎么确定是否高于90%?我们实验室培养方法基本都是一致的,有的培养出口细胞增殖倍数也不高,最高40多倍,不像文献上说的增殖几百倍的。
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26楼
发表于 2014-11-6 10:45 |只看该作者
回复 hefan1234 的帖子
7 O5 C* J! U# W* m9 n; P3 Y
/ C7 A6 A5 M, Y谢谢,按照提供的方法试试

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27楼
发表于 2014-11-6 10:47 |只看该作者
回复 holy0606 的帖子
# m% G: b: t/ X. r* a) Z- G  B9 A6 w+ T% m
我们用的CD3不是进口的,可以吗?下一步可以试试50浓度的

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28楼
发表于 2014-11-6 21:18 |只看该作者
回复 sdzhxq 的帖子+ k4 ?1 q& ?. j, I4 M5 [9 \* Q

" m: I7 d6 q2 F% u6 NPBMC的细胞纯度我也不知如何确定,个人认为应该有如下几个指标:1.离心后获得的白雾状细胞层较纯,少红细胞参杂;2.多次洗涤离心,以去除混杂的血小板等;3.种瓶后镜检观察细胞形态是否均一。
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金话筒 优秀会员

29楼
发表于 2014-11-7 12:08 |只看该作者
回复 sdzhxq 的帖子+ g0 R$ ~2 z* Y9 G* u! w

0 K/ D1 O1 f" p文献上有些数据都是胡编乱造的,不能只看国内文献,多看看外文文献
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