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楼主: sdzhxq
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CIK细胞培养一周死亡   [复制链接]

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优秀会员 帅哥研究员 积极份子

21楼
发表于 2014-11-6 09:39 |只看该作者
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培养基加多了。你试一下加10~20ml培养基...
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22楼
发表于 2014-11-6 09:40 |只看该作者
回复 sdzhxq 的帖子
, }7 l' E+ r* W+ o5 S' w7 {. f# l+ X" @0 ]& N
CD3的濃度有點髙,50就可以,
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23楼
发表于 2014-11-6 09:42 |只看该作者
回复 sdzhxq 的帖子
+ W! i9 }/ i. w4 F0 m
6 K2 v- h+ Y7 ^  L. k1.5---2之間 ,試試看看

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24楼
发表于 2014-11-6 10:12 |只看该作者
一开始有聚团是正常现象,LONZA的培养基直接用就可以。有图片上张图片看看,关于接种浓度1.1x 106/ml 是可以的/ u0 b) J) e6 w0 u6 |+ E" s
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25楼
发表于 2014-11-6 10:44 |只看该作者
回复 fenlichong 的帖子) @1 \) Q9 v; G( M: f/ c0 H

: N/ M7 b& h0 W- U. U; @PBMC细胞纯度怎么确定是否高于90%?我们实验室培养方法基本都是一致的,有的培养出口细胞增殖倍数也不高,最高40多倍,不像文献上说的增殖几百倍的。
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26楼
发表于 2014-11-6 10:45 |只看该作者
回复 hefan1234 的帖子% o& k* c1 I# z' u5 b
( Q1 b1 y- \/ Q
谢谢,按照提供的方法试试

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27楼
发表于 2014-11-6 10:47 |只看该作者
回复 holy0606 的帖子0 R& F' ^  z5 Y6 U; _

8 }# l5 I6 Z# t* V  c2 v我们用的CD3不是进口的,可以吗?下一步可以试试50浓度的

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28楼
发表于 2014-11-6 21:18 |只看该作者
回复 sdzhxq 的帖子2 I/ N3 J; R  f4 s. @

' T6 J" o+ \, L4 t: u, V, tPBMC的细胞纯度我也不知如何确定,个人认为应该有如下几个指标:1.离心后获得的白雾状细胞层较纯,少红细胞参杂;2.多次洗涤离心,以去除混杂的血小板等;3.种瓶后镜检观察细胞形态是否均一。
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29楼
发表于 2014-11-7 12:08 |只看该作者
回复 sdzhxq 的帖子
8 Z) |; d* h# Y% ]  A" }* k: z# q) ~6 D: h7 Z+ }3 z4 `) l
文献上有些数据都是胡编乱造的,不能只看国内文献,多看看外文文献
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