求大神帮忙分析一下我养的脂肪间充质干细胞

weychui

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3 d: A7 Q/ L2 c我养的脂肪间充质干细胞，0.25%胰酶消化1：2传代后，第二天换液时发现细胞背景很脏很杂，细胞看着也不怎么好，是细胞老化了吗？请大神们帮忙分析一下原因，谢啦。

20084720113

目测消化过了，细胞给弄残了。我们都用0.05%的胰酶

a279915845

是不是消化时间嫌长，或者是胰酶浓度嫌高，导致胰酶对细胞有损伤，养几天，勤换液，可能会好点的，

沙漠狐o0

消化了多久哦？30min还是1h？胰酶消化过头了。。。

weychui

回复 20084720113 的帖子( @- i  H% U- x9 N  ?; t: T! E
+ R3 y! M3 ^" j# y$ Q: b, u
哦哦，我看的protocol是0.25%，买回来刚好也是的就直接用了

weychui

回复 沙漠狐o0 的帖子8 ]: ~( X- E4 }0 `  @  @' g7 [
# i6 g, K8 D/ h  Y7 }5 s4 ^
只消化了2min啊，消化时大概每30s震荡一次。。。

weychui

回复 a279915845 的帖子" W! x( k6 M0 ?* `# I0 L* i

/ J& N* ]1 R& W: z7 c还能恢复吗？对了，我每隔三天换一次液，想问一下，每次换液前把旧培养液倒掉后，都需要先用含双抗的PBS清洗吗？

沙漠狐o0

) ~: w  D5 W0 z: F" E3 t( n
& \1 i& \9 s$ J! u& p7 t回复 weychui 的帖子* `* r! d& k/ i- x- s# \

( M  ?- R" Z3 F, y呃...我以为是从脂肪中提取细胞...
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7 \2 I& o' g: |1 j, F6 [4 H背景很脏是因为有油滴吧。