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人脐带间充质干细胞培养   [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2014-11-7 14:46 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
1. 使用Gibco的培养基和胎牛血清(纽澳来源),细胞本身经过三次传代,型态看起来很不均一,​​摊平的细胞很多,请问可能的问题为何?7 y2 A+ Y  v8 c

4 M& c. P" D" `% R2. 这样的细胞满度可行吗?还是要再少/满一点?4 k, r# K& i2 Q0 r: G& U$ w

/ ^$ }7 m8 ^0 d: S, O$ K' z
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沙发
发表于 2014-11-7 16:00 |只看该作者
有些老化的感觉,有很多拉长的,这个密度挺稀的,感觉50%-60%满吧
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藤椅
发表于 2014-11-7 16:52 |只看该作者
能说清传代比例和培养天数吗?
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板凳
发表于 2014-11-7 17:44 |只看该作者
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回复 伊诺强 的帖子& X3 ]* i8 T  @' E
% Q. W) M- t  q) n8 w% N
传代比例: 3,000 /cm^2 5 k$ |% s/ P' s1 Y: u6 G/ o
培养天数: 3 days
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报纸
发表于 2014-11-7 17:51 |只看该作者
回复 WeiTing 的帖子
2 e- j: E- u6 I2 e1 W- n. D7 D
% n- T+ u0 B( h0 S+ i0 W  c9 T我的经验:
) q/ [; q0 ^( [; R0 m5 \可以再满一点再传代,大约80~90%满度,这样能保证几乎所有的细胞都进入对数期。
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地板
发表于 2014-11-10 11:14 |只看该作者
第几代的UC-MSC,看着有很多肥大的细胞,密度有些低,长长再传代吧。
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发表于 2014-11-10 11:38 |只看该作者
还不到80%,建议再培养1-2天再传。虽然脐带间充质干细胞要比一般间充干长得快很多,理论上传代72小时后不应该还没长到80%,建议增加种瓶密度4,000-5000 /cm^2 .
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发表于 2014-11-10 13:17 |只看该作者
密度不够啊,建议再长1-2天,等到80%-90%满的时候再传,个人感觉每瓶种植密度4,500-5500 /cm^2
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发表于 2014-11-10 15:46 |只看该作者
细胞有些老化,继续培养可能会脱壁,接种密度也太低了,我们的接种密度是8000,可以参考下
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发表于 2014-11-11 11:17 |只看该作者
接种密度一般6000左右就可以,3天就可以长满,也不宜密度过大,密度太大消化的时候容易成团
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