免疫荧光封片时候的注意事项？ - 实验室综合讨论区干细胞之家



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eley

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楼主

发表于 2014-11-23 13:34 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

在进行免疫荧光的时候，最后封片，使用Dako封片剂; V/ Y y5 _* G' `* y& _3 ?
但是将玻片从PBS中拿出来之后要进行晾干吗?
拍片子发现里面有好多丝状的东西，不知道是Dako的原因还是什么其他？
* e8 w. {& w0 H
求助

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沙发

发表于 2014-11-24 10:41 |只看该作者

免疫荧光的玻片不需要晾干。
每一张片子都有丝状的东西吗？考虑操作或者显微镜镜头污染都可能引起。
建议晚上做荧光。

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moluxingke

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藤椅

发表于 2014-11-24 11:00 |只看该作者

我们之前用的甘油封片，不需要晾干，现在采用的是一种带细胞核染料的封片剂，不需要单独染核，直接封片就行，也不需要涂指甲油什么的，就是比较贵。
你实验过程中用的玻片都是洁净的吗？如果是那很可能是封片剂被污染，或是洗涤过程中有东西沾到玻片上了。9 h' r) F( {8 c5 l( V* y
想排除封片剂的方法也很简单，找个干净的片子直接滴加封片剂。封片后镜下观察是否还有类似现象。