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[请教] 台盼蓝染色 [复制链接]

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楼主
发表于 2014-12-8 11:06 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
本人有疑惑:我是从原代组织中分离的细胞,想用台盼蓝测活率,但是有些去除不干净的红细胞会影响吗?如果也能够正常的染上的话,到也无妨吧?
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沙发
发表于 2014-12-8 12:23 |只看该作者
要是rbc多的话就会影响你的存活率啊,如果染上了那么死细胞变多,存活率降低……如果没染上,那么活细胞变多,存活率比实际高……
" S' N5 K# Y# x8 D/ N: P( ~  j: B所以还是想办法把红细胞搞干净吧,裂解掉之类的
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藤椅
发表于 2014-12-8 13:04 |只看该作者
使用细胞技术仪还是血细胞计数板?要是技术仪的话我们用过红细胞基本没什么影响,活率也没什么事……
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板凳
发表于 2014-12-8 21:47 |只看该作者
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有白细胞稀释液可以裂解红细胞
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报纸
发表于 2014-12-9 09:59 |只看该作者
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. }: M7 ]% t$ v6 C! I. @, r: f
7 ~8 n8 Z) e7 y$ Z8 l' {5 ?. |无论红细胞是死是活,台盼蓝都不会染上色的,因为成熟红细胞中没有核酸不会与台盼蓝结合。如果你分离的细胞比较大,而红细胞相对又比较少的,能够较好分辨的话就不影响计活。如果难以区分,红细胞又比较多,建议用溶血素先裂解红细胞,然后再进行计活,否则活率易表现为偏大。
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地板
发表于 2014-12-9 17:31 |只看该作者
回复 aochongyu 的帖子
) g% e9 A9 A+ o: Q( ^2 k  x% w/ ^9 f  B' {4 @
我们也有计数仪的,国产的.。您说的没有影响,具体怎么解释?

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发表于 2014-12-9 17:32 |只看该作者
回复 鬼赦秉 的帖子1 Q. I7 j, \5 ]# p

8 J* B! Z4 g& v% X没染上是会增加整体活率的,但是如果跟白细胞一样能够正常染上,那活率也应该是正常的吧
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发表于 2014-12-11 09:44 |只看该作者
回复 花饶然 的帖子
3 @9 _4 x: q% |! r) g7 [) v* z4 ~6 q$ m9 m/ C: q  m" \
依据细胞粒径不同会有影响的,而且影响一般会随着红细胞比例增大而变大,不论红细胞是否能染色,如果粒径与目标接近就可能造成如下影响:
9 Q7 {* d0 m# F( m5 ?: \1、按照楼上前辈说的“无论红细胞是死是活都不会染色”,那么计数仪就容易将红细胞视作目标细胞,这样得到的计数结果就会导致目标细胞实际数量低于计数值,而活率高于计数值;1 A5 T* R; I. l5 M+ U
2、假设红细胞全部被侵染,所得计数结果总细胞量偏大,或许可显示目标细胞的活细胞量,但细胞活率计数值会偏低;
7 q% T, ?) S# z3 @% Q2 |3、再假设红细胞部分被侵染,所得计数结果中除总细胞量偏大外,其余活细胞数量值、活率值均会有不同偏差。
4 v2 s6 P( S4 R5 K- ]
# Q3 \; Z: Q' B% e3 T如目标细胞粒径与红细胞粒径差别较大,可以考虑依据粒径不同区分,但仍可能有较小的误差。& W3 o/ H: S' I2 @) Q0 X" z, `
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发表于 2014-12-11 15:17 |只看该作者
为了以防万一,还是先用红细胞裂解液(如冰醋酸)先将红细胞去掉,之后再用台盼蓝技术就没什么问题啦。
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发表于 2014-12-11 16:58 |只看该作者
红细胞应该好辨认,影响不是很大吧,应该是一些细胞碎片到时会误以为是死细胞影响活率计数!所以应该可以直接染色,前提是红细胞不多的情况下!
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