求教：关于CIK培养的几个问题

chslyx

有几个关于CIK培养过程中的几个问题请教一下各位老师
& \7 J" g3 O5 L' q1、cik培养中CD3，IL-2，IFN-γ的具体作用分别是什么啊？
# d+ p, o( S  [+ H: l2、为什么是在培养的第零天加IFN-γ，第一天加CD3，IL-2呢，为什么要这样加，为什么不可以一起加进去呢？. {# ?5 ^( B/ y& J9 \0 @- i
3、双阳性细胞比例可以通过什么方法增加吗？
( k& @! ~7 W  B* b8 t+ P4、通常培养中细胞密度是多少？
. x& W/ ~' u% K; |" Y$ g& o5、为什么通常要在第十四天进行回输？

Nanaowan2014

同问，顶一下，

霍艳飞

CD3分子在T细胞活化信号的转导中起着极其关键的作用。CD3激发型单抗能够模拟抗原与TCR/CD3复合物的识别和激活过程，从而引起T细胞的增殖与活化，因此是CIK细胞培养中不可或缺的刺激因素。
0 E! L5 U$ f6 f+ Q9 {* t3 K' tIL-2 (白细胞介素-2)8 [8 O6 p9 A2 l4 J8 E
IL-2最初发现时被称为T细胞生长因子(T cell growth factor, TCGF)，是引起T细胞增殖最重要的细胞因子。IL-2既是自分泌细胞因子，也是旁分泌细胞因子，其通过与T细胞表面的IL-2受体(IL-2R)的特异性结合而促使T细胞活化，并进入细胞分裂状态。此外，IL-2还可刺激NK细胞的生长并增强其杀伤能力。因此CIK细胞培养中须添加IL-2，以促进T细胞的增殖与活化。
# h) p+ l4 y* D% X2 i& v
2 B' j* }: ~( v2 z% L3 FIFN-γ (干扰素-γ)( f: n% m7 y( N2 V' y6 J% s5 x
IFN-γ 具有上调外周血淋巴细胞表面IL-2R表达的作用，因此会增强T细胞对IL-2促增殖反应的敏感度和强度。在诱导CIK细胞形成的过程中加入IFN- γ ，可降低IL-2的用量。研究发现，IFN-γ加入的顺序与CIK的细胞毒活性密切相关。先加入IFN- γ，培养24后再加入IL-2，可明显提高CIK的细胞毒活性。/ i! t! D: R# S- k: U7 I4 N( f

a276038921

1.说简单点就是 CD3是激活   IFN-γ是诱导 IL-2 是增值
0 i1 i" X- g. i1 ?3 q  K$ i2.这个问题不太清楚 我过我试验过 IFN-γ CD3 第0天添加  IL-2第一天添加  感觉效果还不错。: ]9 @2 P. T! ?- Z; t; u  F
3.不知道- K  U8 r, {! T& V- l
4.1-3*10^6 就可以了$ A( Y  H& }4 `; }
5.正常培养14天细胞的状态和细胞量都很好了，如果时间在长的话细胞就会出现死亡的现象而且细胞活力也会慢慢的下降。

霍艳飞

培养10天表现出杀瘤活性，在15天到20天达到高峰，因此临床上CIK细胞在10到20天获取