骨髓间充质干细胞自发形成结节

yiwuya007

利用大鼠骨髓间充质干细胞做诱导分化成脂和成骨，铺板1周多，为什么对照组（低糖DMEM+10% FBS）自发形成结节了呢？是不是密度很高的时候，自发就会形成结节？怎么避免？大家有没有遇到这种情况？

奇幻雪蓝

养过其他细胞自发成节的，有以下原因：
. N" w# i9 U, t2 [* ~1.细胞浓度过低，加入2%-3% FBS后，情况慢慢好转；
% y' P4 n' F( d5 ~% r2.细胞浓度过高， FBS浓度过高，补加不含 FBS的培养基，成节现象慢慢好转。
5 N/ y: D; F: |, ?  `$ n6 ?1 x希望以上总结对楼主的实验有所帮助，祝早日解决问题！

weijunning

一般密度高时，细胞会长成团状，建议成骨诱导前，细胞密度控制在50%时加诱导液；成骨不像成脂，加诱导液之后细胞就不再扩增，加入成骨诱导液后细胞还是在扩增的，如果加诱导液前细胞密度过高，在诱导7天左右就会细胞聚集成团，导致实验失败。

yiwuya007

回复 weijunning 的帖子
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谢谢，看来只能重新诱导一批了

奇幻雪蓝

回复 weijunning 的帖子9 A# S% N  {1 x$ C
- z' B6 o+ O3 X' O
细胞密度控制在50%？是怎么操作呢？