小鼠iPS诱导靶细胞形态变化图，大家帮忙分析下是否正常

宋红卫song

回复 琴心杜若 的帖子# c3 X7 E9 ]  g* k$ e

2 p, j3 d  e3 c! |) _( y- L上次刚做了一批，诱导成功了。你做的是什么方向？

祖传老军医

请问LZ的鼠是在哪里购买的？GFP是全身表达还是特异性表达？

宋红卫song

回复 祖传老军医 的帖子" ~+ R8 Q* g1 Q( F0 C# `3 k

! g1 ^  d( G2 \  R5 h+ G4 Q南京模式动物研究所。Oct4启动子连GFP，不是全身表达，在Oct4表达的部位表达。

lchanlon

9天的第一张相片和最后一张相片不是iPSCs, 那些细胞是transformed细胞，就能肿瘤细胞一样。不知道这样的细胞多不？不知道你是不是加了c-Myc。其他的几张应该是编程不完全的iPSC， MEF细胞最好是三代以内的，这样效率比较高，拿到iPSC的可能性比较。可能加在一下Oct4的用量，量可能是其它因子的两倍。

宋红卫song

回复 lchanlon 的帖子4 k) f6 o. A/ y

* }! e0 ^2 S8 _3 n6 z用了c-Myc的，跟您的想法一致，我也认为很多“克隆”是transformed细胞。不知怎的这批实验细胞就是长得很慢，后来做的细胞就疯长了，也出了iPS克隆。感谢您的建议！

无涯

应该不是病毒滴度不够，如果滴度不够，基本感染不上细胞。而你实验中细胞出现了明显的MET阶段，应该是病毒感染后四因子蛋白表达了，但是重编程后期克隆没有致密化。你的ips培养基可能有问题

宋红卫song

回复 无涯 的帖子& f* ?4 E2 u0 u' s; J( ?9 n3 i

  i) {6 P$ T  }, u嗯，后来也发现可能是培养条件引起的，跟病毒滴度无关。谢谢您的回复，我觉得是最中肯的了！

快乐小泡

请问，我诱导第15天看到小的细胞簇，很亮，立体感很明显，不知道是不是正常呢？

快乐小泡

回复 scottist 的帖子
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5 b# W" `  O$ I7 l2 y请问，我诱导第15天看到小的细胞簇，很亮，立体感很明显，不知道是不是正常呢？

快乐小泡

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这是诱导第15天时的细胞簇，请问这是正常的吗？