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楼主: 宋红卫song
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小鼠iPS诱导靶细胞形态变化图,大家帮忙分析下是否正常   [复制链接]

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发表于 2015-5-23 15:37 |只看该作者
回复 琴心杜若 的帖子
% O1 g9 o: g  z( P* ~: Y' c  Q& v4 F# f
上次刚做了一批,诱导成功了。你做的是什么方向?
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发表于 2015-6-17 13:59 |只看该作者
请问LZ的鼠是在哪里购买的?GFP是全身表达还是特异性表达?
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发表于 2015-6-18 14:45 |只看该作者
回复 祖传老军医 的帖子/ q0 C. ~, ^1 D9 ~& w! d
# r" I  j! r) A0 b* p! v
南京模式动物研究所。Oct4启动子连GFP,不是全身表达,在Oct4表达的部位表达。
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发表于 2015-6-18 23:57 |只看该作者
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9天的第一张相片和最后一张相片不是iPSCs, 那些细胞是transformed细胞,就能肿瘤细胞一样。不知道这样的细胞多不?不知道你是不是加了c-Myc。其他的几张应该是编程不完全的iPSC, MEF细胞最好是三代以内的,这样效率比较高,拿到iPSC的可能性比较。可能加在一下Oct4的用量,量可能是其它因子的两倍。
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发表于 2015-6-19 07:54 |只看该作者
回复 lchanlon 的帖子% e& e0 y$ z1 P8 P! n$ }% P8 U
; A6 _  b) D4 ?) ^$ W/ ^9 c8 u
用了c-Myc的,跟您的想法一致,我也认为很多“克隆”是transformed细胞。不知怎的这批实验细胞就是长得很慢,后来做的细胞就疯长了,也出了iPS克隆。感谢您的建议!
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发表于 2015-11-3 10:34 |只看该作者
应该不是病毒滴度不够,如果滴度不够,基本感染不上细胞。而你实验中细胞出现了明显的MET阶段,应该是病毒感染后四因子蛋白表达了,但是重编程后期克隆没有致密化。你的ips培养基可能有问题
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发表于 2015-11-8 11:55 |只看该作者
回复 无涯 的帖子
/ ~" T: O0 g: o, C' O& o1 X' ~, U( h# A5 ?
嗯,后来也发现可能是培养条件引起的,跟病毒滴度无关。谢谢您的回复,我觉得是最中肯的了!
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发表于 2016-4-5 13:30 |只看该作者
请问,我诱导第15天看到小的细胞簇,很亮,立体感很明显,不知道是不是正常呢?
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发表于 2016-4-5 13:32 |只看该作者
回复 scottist 的帖子) g# Z4 p/ W2 c3 L9 s5 V
/ P9 b2 W4 N- E% G
请问,我诱导第15天看到小的细胞簇,很亮,立体感很明显,不知道是不是正常呢?

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发表于 2016-4-5 13:41 |只看该作者
回复 scottist 的帖子& {" N9 J; B6 l# l) @

: |, T( W6 c! H7 Y2 e% k这是诱导第15天时的细胞簇,请问这是正常的吗?
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