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细胞转袋后得到的细胞量不多问题 [复制链接]

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楼主
发表于 2015-3-4 21:52 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
如何提高细胞的培养数量
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沙发
发表于 2015-3-5 08:55 |只看该作者
能详细说说是什么细胞,怎么操作的?
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藤椅
发表于 2015-3-5 09:00 |只看该作者
是CIK培养吗?能否说下你的方法?
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板凳
发表于 2015-3-6 09:17 |只看该作者
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袋子里细胞的气体交换还是赶不上瓶子养的,一般转袋后细胞的密度都不如瓶子。如果能经常晃动袋子增加气体交换细胞的密度会高点
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报纸
发表于 2015-3-6 15:18 |只看该作者
估计有可能是密度太低。cik转袋子细胞密度怎么也得1.5*105以上吧,活率也得85以上吧,密度太小很不利于细胞生长,太低的话只能增加培养天数,增加成本
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地板
发表于 2015-3-9 09:32 |只看该作者
这样说太笼统了,前10天有细胞集落,细胞没有完全散开成单个细胞,计数细胞数量会偏低
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发表于 2015-3-9 11:30 |只看该作者
我也有这样的疑问

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发表于 2015-3-10 08:22 |只看该作者
整体来说细胞瓶的比细胞袋要养得好些,当然要排除个体差异、培养试剂、方法等因素
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发表于 2015-3-10 09:17 |只看该作者
如果是CIK培养,可以从下面方法提高细胞培养数量# d' t, ~1 M- M2 y% ]3 ?' q
1、提高MNC细胞提取量,可以多采血,或采淋巴值较高的血样,悬浮细胞喜欢富集生长,一般情况下初始细胞越多,细胞长得越快越好。
7 a0 I( i( T! {. P& J- \4 O1 w2、对细胞的体外扩增活化要彻底。要观察活化效果,效果较好时再介入大量培养基。+ k5 [( r3 ^4 P' g
3、保证细胞的密度,不要太密也不能太稀,一般低不能少于2*105,高不能多于5*106.初次铺瓶的时候密度也很重要。
& N0 s5 U1 Y* q7 M2 c# T4、培养过程中可加血清,刺激生长。
6 h6 j* ]3 t" A5、达到一定细胞密度后再转袋,袋内培养可经常晃动袋内培养基,加快气体交换。
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