想请问一下针对临床应用的免疫细胞培养扩增技术的问题，求指导

nailute1985

目前正在设计NK细胞的免疫治疗实验，以后应用于临床治疗。我想请问一下，有关文献中有提到扩增NK或者CIK，DC之类的免疫细胞所用的培养基中有很多是加了FBS或者其他血清的，这个对NK细胞扩增与不加血清相比有更好的扩增效率吗？因为以后要应用于临床，加了FBS之后对病人有何影响？如果是患者自体血清做培养基血清可行否？有何影响？求指点，谢谢

维维睡啦

加和不加血清在NK的实际培养中有很大差距的，加血清的确能获得更好的扩增效率。如果要应用临床的话，只要是血清的质量过关，添加适量，对病人基本没有影响，但是FBS问题的敏感性，在临床上不建议使用FBS，会造成不必要的麻烦，我们现在就是用的原血的自体血清，灭活后就可使用，使用上也很少出现问题，如果自体血清不好在考虑使用其他血清。

nailute1985

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哦，请问你做过NK细胞培养技术吗？能否介绍一下你用的培养基是什么？有一种NKGM培养体系听说过吗？不知道效果如何。

nailute1985

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7 J' r; A: p9 a! i能否介绍一下你们扩增NK细胞的方法，如果不影响你们的保密性的话……比如加什么因子，多少量，之类的。还有就是你们有没有预纯化NK或者在培养之后纯化一下。

霍艳飞

加合适的血清对细胞生长与扩增有促进作用，一般加5%自体血清，

nailute1985

回复 霍艳飞 的帖子7 k: K1 G4 ?- n" j2 U) j, A% b
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等于100ml培养体系需要加入5ml自体血清对吧？但是举个例子，如果取病人外周100ml血的话，他的血清差不多50ml左右，在后期培养过程中，如果是每次补液的话也要加入血清对吧？要是半量或者全量换液的话，病人的血清应该够这一次培养过程的吧?

霍艳飞

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3 ^, G! {+ r0 k1 h; G( y, @6 H8 A
4 R: x8 ]: r1 X7 k! }/ u( r这么频繁加血清？  只要合理将自体血清依次全部加入不浪费就好啊    不同时期加血清 培养效果也不一样

lt595370417

血清一般都是前期（前五天）作用比较大，可以多加些（10-15%比例），后期有的话可以加，没有的话不加都行。这是经验之谈。

chlbbc8611

这么说的话应该是自体血浆吧，100ml外周血，血浆50ml左右，分离当天加10%左右，剩下的在前5天加完，对细胞培养有促进作用。