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胎盘间充质干细胞培养问题 [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2015-4-10 10:40 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
我们的胎盘用组织分离器分离完后,在进行酶消化,再用100um的无菌滤网过滤,最后得到数量很多的细胞悬液,可进行进一步的细胞培养,但问题是每次的细胞活性都不高,都只有2%左右,还是保守估计,请问有哪位高手知道 就细胞活性这个问题有什么好的办法?
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沙发
发表于 2015-4-10 13:25 |只看该作者
具体的步骤太模糊,有没有可能是酶浓度或者活性的问题,或者是换液的问题
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藤椅
发表于 2015-4-10 14:52 |只看该作者
回复 小小龙001 的帖子
. k2 c+ K& w; Q$ E/ c6 F9 n4 B8 F. U! T$ M$ h3 c
2%是分离后的细胞活性  每次用酶法消化得到的细胞悬液测试活性 都在2%左右
* l$ \6 Y. k7 G% p$ i8 Z
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板凳
发表于 2015-4-11 09:39 |只看该作者
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过程表述不清啊,; f% j7 U) {" c0 R/ N0 t3 z
1. 你看下消化时间是不是太长了,酶消化的同时对细胞也有伤害,消化完毕最先得到的细胞可能已经活性很低甚至死亡了
* i# Y' [. I' |) ~) C( r2. 细胞很多那么种植密度和培养液选择是否达到细胞生长要求4 Q4 N* }8 J6 L3 L
过程中的吹打次数力度也要掌握的,液体的剪切力对细胞影响很大的7 g! b6 I) ^6 F8 C& U
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金话筒 优秀会员

报纸
发表于 2015-4-13 11:29 |只看该作者
本帖最后由 yuanyecat 于 2015-4-13 11:30 编辑 5 D+ Q' R- y  w- A% o! O! o
, z7 b& {5 O. X( x/ H3 m6 L, @
你是用哪种酶消化的。不要用强力的酶比如trypsine。可以考虑活性弱些的。另外消化时间也会对细胞活力有影响。
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地板
发表于 2015-4-13 11:58 |只看该作者
可以选择用组织块培养的方法
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发表于 2015-4-13 16:09 |只看该作者
應該是酶消化的濃度和作用時間造成的,無菌過濾時的壓力與流速也不能太大
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发表于 2015-4-14 15:56 |只看该作者
为什么不用组织块贴壁法呢?
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