为什么我用全血细胞培养间充质干细胞最后贴壁的全是圆形细胞

maxim

我用全血细胞贴壁法培养兔骨髓间充质干细胞，最后贴壁的全是圆形细胞 ，很少看到典型的梭形细胞，并且他贴壁还很闹靠，PBS洗不掉。难道这是淋巴细胞？文献上是说的全血细胞培养72小时候吸取悬浮生长的细胞最后贴壁的就是干细胞的嘛 。并且去我用的同样的方法就培养出了干细胞，怎么现在就不行了 很奇怪 ，并且同样的方法有一空有有一空就变成这种。
  o9 Q; T) c0 H+ P, C3 A我想请问淋巴细胞要贴壁生长不？

夜的诗人

估计是内皮细胞或内皮祖细胞

夜的诗人

淋巴细胞应该不会贴壁 4 u% ?+ y/ V: `# u
楼主可以适当延长时间到四五点再将悬浮细胞吸出
3 z' o1 Y% T; E3 |# C* k我发现第一次换液的时间越长往往得到的干细胞越多
0 |4 c& a& C& U关于杂细胞的问题 传到二代时基本上就没有

hbling2003

最好三天后首次换液，首次换液半换液

mojai

1# maxim ) b3 [) F! P! S
" [8 l7 e( K5 |0 A0 m) T% x
方法虽是一样，但得保证原材料也是一样的，才能做出重复性试验。因为全血成分复杂，个体差别很大，极可能影响细胞的生长。建议你用成分可控的培养基培养，例如合成培养基+血清

jiefengbing

你培养的是原代细胞还是传过了几代的 我曾经在分离人骨髓间充质干细胞的过程中，也出现这种情况，很多圆形的贴壁细胞，我当时怀疑是淋巴细胞，但是在继续培养过程中，这种形态的细胞逐渐消失，不过细胞我还没有用流式鉴定，不太清楚纯度怎么样

baichunyu

2# 夜的诗人
( r% W. l" s% h1 |( V' y8 L4 E/ C' n- c6 I( @- a
, b9 }3 K( r/ z* \) e
与我的思路相同，当有大量内皮细胞生长时，无意中创造了共培养的条件，间充质干细胞很有可能被诱导为内皮细胞。 可根据差速贴壁去除。

zlz2626

差速贴壁!  可否在详细些  谢谢

mbjane

期待对差速贴壁的详解

mbjane

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