关于脐带间充质培养的问题

alicia_86

一般来说第7天就有细胞爬出来，12天还没爬出来肯能你剥离血管和羊膜的时候把华通氏胶也给剥离损耗了。如果一开始做技术不好可以不剥离羊膜不影响细胞爬出来和纯度。1-3mm3的组织块接种后放置培养箱4-5h后再加液。我们75T的培养瓶就加5ml液。第4-5天换液。第6-7天就大量细胞爬出来。

791849046

可以选择直接悬浮法来培养呀  比贴壁法操作简单，每个培养皿里直接加入培养基10ml，3天半量换液，一般在一周之内就可以看到细胞贴壁了。

cjsbaicai

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. I: R  S6 @8 ~4 C9 }; s( x2 f& y楼主用的是物理分离方法，即让间充质干细胞从细胞块中自由爬出。但这种方法有以下几点需要主要：1. 组织块要足够的小；2. 种瓶的密度要合适；3. 倒置培养不一定是必须的。此外，少量组织块悬浮也是正常的现象# l5 }6 s6 _! z

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chrindy

请问各位大侠，如果要把剪碎的组织块放进培养瓶里面，大家都怎么放的呢？？我用显微镊夹又觉得很容易把平底刮花细胞不好贴壁，用枪头吸又容易堵枪头...还想问一下我要是种25cm的培养瓶要放多少组织块呢？？生长因子大家都用2ng/ml的bFGF吗？？

细胞海洋

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chrindy

回复 细胞海洋 的帖子$ Y9 {, E8 B* Q: V% u
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多谢提醒！

lyj-0017

回复 edwardellen 的帖子- s% e2 X- N: X5 T! B4 a

$ X9 C' [: S" Z8 U' a你好，同学！能否把你的酶消化方案分享一下？学习一下，谢谢咯

阿秀哥

你换液的频率是不是有点太快了，一般脐带间充质干细胞都没那么快有细胞爬出来的

Llxue

建议楼主可以换成培养瓶试试，倒置过夜，可以加点培养基在倒置后的瓶里，第二天翻瓶时小心轻轻的将培养基浸过组织，保持它不干就行，过三天再半换液，一般7-14天会长出细胞，间充质原代培养要有耐心，细胞爬出的时间不定的

wzs1985

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( E9 N+ \0 x) A0 E7 V5 }1 A想问问你们是用哪个公司的商业化培养基，一般扩增比率是多少？