间充质干细胞放大培养的问题

WeiTing

使用与培养在175T flask相同的细胞密度，放大培养于Cell Factory 10 (CF10)中，在相同时间下，收获的细胞有明显的差异 (CF10收获的细胞数目明显减少)，请问为何会有这样的差异? 有方法可以改善吗?

奇幻雪蓝

从小试到工厂，注意好多事！

杏色玻璃

应该注意一下您所用的CF10工厂的表面处理是不是个T175 相同，如果不同的话细胞很可能长势不好，那么就需要将细胞驯化之后再扩大至CF10.

单个核细胞

回复 WeiTing 的帖子2 a1 a( |7 w, N9 H# n1 X
' B+ l/ k- z6 d% i$ z: I
以下几点你可参考：3 i6 L+ M+ @9 s* ]8 ^# f
# q9 Q% w$ n, a4 N5 `: X
1、接种时，每层细胞是否分布均匀？& w) ^7 L( V/ o- n! \
2、收获细胞，消化是否到位？
3 P4 _$ d$ U% H, c+ \$ J4 c3、计数时，如果手动计数，结果是否准确？
' W3 l/ o  S' q0 G
, Z. o8 S1 H; b& D+ G/ H6 G4 Y4 u我做的实验，细胞量确实比预估量要少，要少10%-20%。

蜗牛爱贝贝

扩大培养，不是简简单单的，把培养基 细胞什么的等倍数加大的，首先细胞需要驯化，生物反应器是否合适，培养基ph值，细胞接种时的均匀程度，收集细胞时的消化，很多因素，需要慢慢的改变，摸索，建议多参考些其他文献，在设计生产

杏色玻璃

首先得注意一下T175和CF10表面处理是否一致，如果不一样最好驯化后再转工厂；消化后要离心除胰酶；首次接种可适当加大密度；注意每层细胞液分布均匀，同样工厂消化的时候也要确保每层都有胰酶均匀分布，否则消化也可能不充分最后导致所得细胞量不如预期。