人胚胎干细胞神经方向诱导，拟胚体贴壁2天后，形态有点不对

zkfootball

人的胚胎干细胞神经诱导，采取拟胚体悬浮6天，然后贴壁10天得方法。
- f5 N3 e& r  g4 u) I5 V' U但是贴壁第二天，感觉和以前做的形态差别挺大的。不知道为什么。用matrigel铺的dish.. f0 t1 M; x: t1 l0 o
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现在周围这些细胞核质比比较大，感觉像是未分化的

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第一张图是以前做的，下面2张是现在做的

cloudycity

1. 第二第三张确实还没分化呀， 分化好的话，有很漂亮的神经花环~不过每次做，都会有些克隆还没分化，只是多和少的问题。是不是之前胚体状态不好~6 ]% _' S7 a3 |- h. h9 K9 v
2. 会不会有支原体污染，可以检测一下，影响也蛮大。
  T6 q" [+ C5 I2. 你用的胚体培养基是什么培养基？KSR？我培养胚体用的是N2B27完全培养基，还不错，感觉比ksr好，出现这种情况的概率也会小一点，我是悬浮胚体悬6天，第7天贴壁，一般2-3天就会出现很多很漂亮的神经花环，细胞爬也爬得很快~

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' z0 y2 I) h, TThank you for reply

watchen198891

首先你用的拟胚体培养基是什么，第二你这次配置该培养基的时候跟上次的有什么的不同，第三你的EB球大小是否均一，第四按照你后面的图片来看，你悬浮6天后，感觉那些细胞并没有分化，这可能在反应你的拟胚体培养基是否出现了问题，一般只会很少数的比较大的EB才会出现你这种情况，还没有大量未分化的细胞存在，另外你的EB是否能够分层，EB的状态。