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请教:诱导iPS细胞,四个转录因子,它们来源是(胚胎干细胞)ES细胞吗?   [复制链接]

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楼主
发表于 2015-5-9 09:11 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
干细胞之家微信公众号
大家好,我想问一下关于ips细胞的知识,以后自己可能 也想从事生命科学呢! 拜托大家了!
- ~+ k+ h$ F9 T. m$ z: c: F2 R$ g: u/ i: B/ `) _$ g. x
我知道ips细胞是通过, 把Oct3/4,Sox2、c-Myc和Klf4这四种转录因子基因克隆入病毒载体,然后引入成纤维细胞,发现可诱导其发生转化,产生的iPS细胞在形态、基因和蛋白表达、表观遗传修饰状态、细胞倍增能力、类胚体和畸形瘤生成能力、分化能力等方面都与胚胎干细胞相似。/ y( z+ [; X) s7 x
- D- g, ?- _# ]4 W' U, x

! R0 P% c& I5 U, m2 F我想问一下:这个诱导iPS细胞的 四种转录因子(Oct3/4,Sox2、c-Myc和Klf4),它们的来源是真正的胚胎干细胞ES细胞中的吗?
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沙发
发表于 2015-5-9 09:32 |只看该作者
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/ Z/ U9 u$ O* ^
$ }. i- q7 f  `0 o; S) O9 Z4 P应该是的,Yamanaka2006年那篇cell中就是通过比较已分化的细胞和ES细胞基因表达的差异筛选的,所以这四个因子是ES来源的,但需要说明的是cmyc不是,加入它是为了打开核小体结构的。
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藤椅
发表于 2015-5-9 09:48 |只看该作者
回复 z2654502 的帖子
1 R% \. t8 @6 k+ v; D8 N
* X1 D7 P9 g8 P: I$ u4 h  u5 Ohttp://www.stemcell8.cn/forum-fo ... igest-digest-1.html/ D; P9 ]6 d& e" k) m1 t( _6 Q6 k( z5 o, n
$ Y, U5 o  ~3 |/ ~/ z4 d
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金话筒 优秀会员

板凳
发表于 2015-5-11 19:09 |只看该作者
既然是四种转录因子(Oct3/4,Sox2、c-Myc和Klf4),那应该是普适的,在那个组织或细胞中都一样吧。所以是不是ESC又怎样?关键是要过表达这几个基因么:lol
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报纸
发表于 2015-5-12 12:01 |只看该作者
来源是什么不重要。重要的是他的研究思路:通过研究胚胎干细胞特异性表达谱初步进行筛选,然后通过大量的实验最后确定可以将成纤维细胞诱导为iPSC的组合。这也是现在大多数类似研究的通用思路。
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地板
发表于 2015-5-20 22:49 |只看该作者
回复 zhen022 的帖子& L9 x+ O, y0 w8 }" F& K/ b
3 r5 N( F8 n6 Q7 o  a
你好呀,谢谢您了
8 ~) x) k" d7 C! n) l0 p( }* Y" Y! }( w5 s
是不是说,人体几乎所有细胞都有Oct3/4,Sox2、c-Myc和Klf4 这4个转录因子吗?
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发表于 2015-5-21 00:05 |只看该作者
不是,即使是干细胞的诱导也是有特异性的
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发表于 2015-5-21 09:14 |只看该作者
回复 wangguan 的帖子; m7 P3 o" i0 p4 q' }

  C/ U3 @3 q9 b- Y% i0 {, s- k- W你好呀。 9 b- X" i* E! e
5 Z' w) Y+ z, f; H+ w0 ^2 f
您说的这个“干细胞的诱导也是有特异性的”  是什么意思呀? 拜托了~~  急!

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金话筒 优秀会员

9
发表于 2015-6-5 11:33 |只看该作者
回复 z2654502 的帖子
# M; ?2 \+ ?8 |' V! Z" V8 {$ `" o5 {" T* O/ v
不知道你说的这个Oct3/4大概指什么?你要是说指的是表达这个蛋白质的对应基因(POU5F1),那基因本来就是存在的,只是有没有表达的问题。你说蛋白质在细胞中有没有存在,那就不是很清楚,我觉得有,只是普通细胞的水平比较低,要不然当时做iPSC的时候就不是过表达OCT3/4了。基因组对每个细胞系而言几乎没有差异的,后期最终效应产物(蛋白,小RNA等)是因为其他因素影响的。
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发表于 2015-6-11 14:06 |只看该作者
简单来说:
) f3 b$ t3 b; o他从胚胎干细胞中特异表达的一些因子中进行筛选,所以胚胎干细胞中就有这4因子的表达,所以就有这4因子的mRNA,所以他才可以获得cDNA,所以他才可以构建4因子载体。+ K$ A  K+ R6 _; q  N( l/ Z
而体细胞中确实有这4个因子的基因!,但是不表达啊(个别也表达),所以就无从获得mRNA,也就没有cDNA,也就无从构建载体。
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