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干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站 干细胞之家论坛 免疫细胞治疗专区 脐血培养的CIK到第七八天就长不扩增了
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楼主: 小跑
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脐血培养的CIK到第七八天就长不扩增了     [复制链接]

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发表于 2017-4-10 11:19 |只看该作者
我现在也遇到同样的问题,外周血培养CIK细胞长势极好,而且很稳定,但是培养一例脐血来源的CIK则效果不佳,细胞越来越少的感觉。反复思考,莫非是枸橼酸钠的缘故?现在考虑更换抗凝剂试一试。
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发表于 2017-4-10 11:34 |只看该作者
1.采血时间最好小于8小时。 超过10个小时以上的血培养起来增殖比较困难。基本10个小时内的血,我们重来没遇到过长不起来的。脐血30ml,实际培养到14天CIK细胞总量一般都在60-80亿之间。9 H! I+ l9 [: D8 [$ U  b' H* d! f
2.仅仅是做CIK细胞培养,抗凝剂差别不是特别大,几种抗凝剂我都用过几千次了,细胞状态都差不多的。+ A7 V+ e4 p. y8 e# o) T
3.分离出来的PBMC接种密度一定要注意,最好在1-3*106/ml,密度太小细胞生长肯定不好。 如果得到的PBMC比较少,那就接种体积小一点,等第三天了在分瓶放一天细胞量起来了再操作。
2 L2 t- s- p' w' F" H/ c4.培养过程中不要每天加液,最好是隔天加一次。加液时,一定要根据细胞密度进行。一次加多了,细胞生长就会慢很多,加太少细胞营养跟不上。
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发表于 2017-4-10 13:43 |只看该作者
是不是因为脐血在分离这部没做好,红细胞过多影响cik生长
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发表于 2017-4-11 09:32 |只看该作者
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会不会是培养体系要修改一下,毕竟外周血和脐血是不一样的
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发表于 2022-7-20 10:33 |只看该作者
回复 维维睡啦 的帖子+ y: a# d/ R, J( a0 u

" q, q2 d! e# {( Z- V% R+ B( w, b请问枸橼酸和肝素抗凝对提取单核有什么区别影响吗?

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发表于 2022-7-20 10:40 |只看该作者
回复 Ivan0108 的帖子
1 u5 }& Y4 `5 Y: L0 s- a7 ~. W! a0 y% C8 Y2 ~/ b8 _+ u
请问NK细胞培养时,抗凝剂有影响么,有什么区别呢

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发表于 2022-7-28 09:51 |只看该作者
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发表于 2022-7-28 10:42 |只看该作者
" e, Z: Z: a% A, E6 g7 X% I
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