脐血培养的CIK到第七八天就长不扩增了

小跑

回复 zhrt 的帖子& \3 g0 L( B+ K) K. i2 D- _
. s( Q' }& O5 z# p& M
外周血的能培养到一百亿个，一样的培养体系

小跑

回复 luyue6453 的帖子
5 W) Y6 i/ J0 g  [7 k  A1 b
# _6 o' Y% g+ K$ p& `% q8 @我培养的几乎都是前一周长的很好，甚至比外周血还好。后期就不长了，只有十分之一的一直都培养的很好

小跑

回复 spring1221 的帖子$ _0 i! A# r2 @: a$ {+ U: d& z
' b8 f  l# K* p) F; b  J5 S
脐血的量我们也是一直要求多采，但是毕竟不能自己参与，每次的量都不理想。补液时机是没问题的。你说的我明白，细胞有一个旁分泌效应。一般情况下我们是两天一补液，但如果细胞长的快，培养基明显变黄，那就不会等两天才补液。

小跑

回复 维维睡啦 的帖子
8 D! ~* ?) x6 C; I. i1 v3 T  W1 m8 B& l
初始量一般5*10^7是有的，脐血量虽少，但淋巴细胞、单核细胞的比例还是较高的，所以提取的细胞也还可以。. C. [; R; ^$ q5 A. \, n
外周血我们用肝素钠和枸橼酸钠抗凝都用过，都可以正常培养。

zhrt

回复 小跑 的帖子; w+ r) C1 ]7 x% x

9 g7 K' a4 J( o% d0 a你培养脐血来源的有几例？每一例都这样吗？

小跑

回复 zhrt 的帖子3 @8 L0 S8 A2 T. d
: K7 `# ^/ f9 @: V+ v/ a
培养了大概十来例，只有一例效果很好，比外周血还好。其他的都有问题。

小跑

看到有的人培养CIK到第七天再次补加CD3单抗，50ng/ml，这样做单抗用的太快了。

zhrt

回复 小跑 的帖子
' C: i, ]" C+ K
* b8 L0 i3 [& q. V) K4 I: U, F这样可以排除染菌的可能性。加血清没有？前期浓度怎样，血清加多了容易老化的，还有就是加液的时机，细胞的密度怎么样？再有做个流式看看培养出的细胞表型，以排除非CIK!

Ivan0108

脐血细胞生长不好几个原因：
7 O) n7 {! v* w3 c+ }% n; s4 i& n1、枸橼酸钠抗凝剂采血没有什么大的影响，关键是采血时间带分离不能超过12个小时，5小时以内最好。
$ C  k; E' i/ ]  @1 R* p5 g2、采血量建议增加，加抗凝剂一起70-80ml为宜。低于50ml的一般很难培养起来，除非采血时间在5小时以内。$ K5 u# q' Z; |, y
3、细胞接种密度，一般推荐2-3*106/ml最好，接种密度太低会导致细胞生长不良。& ~6 w$ I# O- e$ f2 L
4、目前推荐使用培养基种类：gibco、lonza  ，美天旎，corning，日本研究所ALY等细胞均可正常生长。# F' m* l+ |: Y! M9 S- w3 O2 N
5、细胞装袋、加液密度：刚开始接触，建议装袋前测密度 保证装袋后细胞密度在0.3-0.8就可以了。 每次加液时，建议计算密度，保证加液后细胞密度维持在1.0-1.5最好。

momoenn

回复 维维睡啦 的帖子
: F3 y8 \3 S, ~: n: T; B) f8 r; l: B
9 L6 u3 v0 }8 L; S, F同意