Cell stem cell：纯化人类细胞新技术（附原文）

defu

- J5 ^$ Y" K# ~2 t  S
1 q  Y% ?4 }) Z( J* t1 Y, i来源：生物谷 2015-05-26 10:10- M6 ~- ~8 S9 |7 W9 e) {
4 @% K0 d! a: R5 }2 e" {

2015年5月26日讯 /生物谷BIOON/ --多能干细胞研究之所以流行是因为在生物医学研究中，多能干细胞能够分化为任意细胞类型。但一些代表性的分化方法会导致异质性细胞群体的出现，这时候就需要将目的细胞进行纯化分离。# ~! ]5 q9 b& V9 u! D' _

: P7 A3 z7 l- A5 X2 u- J+ S+ c目前对这类细胞进行分离主要根据细胞表面的特征性受体不同，利用抗体进行分离筛选。但在一些情况下，这种分离方法的纯化水平很低，并且细胞会受到一定损伤。近日，来自日本的科学家在国际学术期刊cell stem cell发表了一篇文章，在该文章中研究人员开发了一种利用microRNA纯化人类细胞的新方法。* f# m% ~, Y* @/ Z
9 k" Z* k* w! ]0 j3 J
在该项研究中，研究人员设计合成了一种能够编码荧光蛋白的mRNA,同时带有miRNA靶向序列，他们将其称为miRNA开关。miRNA开关上面携带的miRNA靶向序列能够被我们感兴趣的细胞所特异表达的miRNA识别，一旦miRNA开关上的识别序列被细胞特异表达的miRNA所结合，这种编码荧光蛋白的miRNA表达就会受到调节，从而将特定的细胞类型与其他细胞区分开来。
  K# ^- H; ]' Y! ]6 P) `+ _6 x9 b- ?1 E9 i# g
目前研究人员已经得到的miRNA开关包括miR-1-,miR-208a-,miR499a-5p-等，这几种miRNA开关均能够有效纯化从人类多能干细胞诱导分化而来的心肌细胞。并且不同的miRNA开关在细胞发育不同阶段作用效果不同，这表明可以根据心肌细胞发育不同阶段表达的不同miRNA将心肌细胞进行分段纯化筛选。' n7 H  _+ H5 f/ P' k, |/ u

9 y6 c, p( v0 k7 ~  a% K% e研究人员相信，在未来的研究中，miRNA开关可以对不同类型的和不同发育阶段的细胞进行纯化筛选，对于细胞生物学和发育生物学研究具有重要意义。（生物谷Bioon.com）, G8 r+ y/ ^) U' ^" j- |  k5 t

& @) j! }4 o, F3 l; q; i+ R5 F3 ^% Y4 M% }; k- S* J) ^0 V9 B& ^

2 _+ J$ T6 N5 F/ p
! |! k. q9 ~& G7 U% \/ m, U- U; f$ I- @8 v
3 |6 d  p4 }1 D) o6 b) F  k: u
DOI: [url]http://dx.doi.org/10.1016/j.stem.2015.04.005" n3 M  W3 ?7 `% r% q

& ~# V5 S: a# fEfficient Detection and Purification of Cell Populations Using Synthetic MicroRNA Switches
  M% Q2 h  N& s6 Q+ _. g! c3 X, C- p( j7 ?& R2 I+ w
Kenji Miki7, Kei Endo7, Seiya Takahashi, Shunsuke Funakoshi, Ikue Takei, Shota Katayama, Taro Toyoda, Maki Kotaka, Tadashi Takaki, Masayuki Umeda, Chikako Okubo, Misato Nishikawa, Akiko Oishi, Megumi Narita, Ito Miyashita, Kanako Asano, Karin Hayashi, Kenji Osafune, Shinya Yamanaka, Hirohide Saitocorrespondenceemail, Yoshinori Yoshida
$ k5 I  h; h8 Y1 p4 z7 k0 s
1 H5 b6 i3 t( @Isolation of specific cell types, including pluripotent stem cell (PSC)-derived populations, is frequently accomplished using cell surface antigens expressed by the cells of interest. However, specific antigens for many cell types have not been identified, making their isolation difficult. Here, we describe an efficient method for purifying cells based on endogenous miRNA activity. We designed synthetic mRNAs encoding a fluorescent protein tagged with sequences targeted by miRNAs expressed by the cells of interest. These miRNA switches control their translation levels by sensing miRNA activities. Several miRNA switches (miR-1-, miR-208a-, and miR-499a-5p-switches) efficiently purified cardiomyocytes differentiated from human PSCs, and switches encoding the apoptosis inducer Bim enriched for cardiomyocytes without cell sorting. This approach is generally applicable, as miR-126-, miR-122-5p-, and miR-375-switches purified endothelial cells, hepatocytes, and insulin-producing cells differentiated from hPSCs, respectively. Thus, miRNA switches can purify cell populations for which other isolation strategies are unavailable.
4 E. N  ^9 g% j2 S1 [
) L2 u* p+ G  y1 C3 X3 G
. V5 F/ M; ]/ g& M/ k) [8 h! Z  y2楼原文 感谢Damon-Salvatore 提供

Damon-Salvatore

) s  Y0 p2 R9 d
  ?9 |/ x2 W+ d
& ?  m8 y+ m- q7 ^