求助，关于脐带间充质死活爬不出来...

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回复 baicaikua 的帖子" j; M, u+ }6 T# ?' w+ J. e
+ c, s# \& `; J; A
类似果冻状的，稀释后没用枪头吹

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回复 309208770 的帖子
% z2 g/ l$ X( @. p' |* I' P7 f7 R( {, n- J+ H
促使贴壁嘛，剪的时候往里加点培养液，加一点就好，加多了会导致倒置的时候组织块掉下来

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回复 hefan1234 的帖子2 v& Q7 h0 e/ P) k
6 N  J) }2 @& E
我和你不一样的就是种瓶后倒置过夜，然后第二天再加培养液，其他差不多，以前也是10天基本就长出细胞了，但是这次不长...话说你用的瓶是塑料瓶还是玻璃瓶？

听不到

回复 deshenglll 的帖子$ u' M) J9 D* k8 t0 f
6 `0 l) R, a& l9 _) X4 a+ `
那你看我之前发的具体步骤上有什么需要注意的吗？

听不到

回复 月_幻影 的帖子. e$ Y% D) |( P* L
3 [6 X- n# t2 D4 o$ O3 @
应该不是，培养箱是实验室公用的，别人都没问题，不过他们养的是肿瘤细胞

caustic

回复 听不到 的帖子
3 K5 w+ j, u% t) n0 B: Q0 E: K8 U
2 z3 O( y& H  O+ i既然你原来的操作都能养出来细胞，就证明应该不会是操作或是培养基的问题了 很可能是标本本身的问题，说实话，我们实验室也不是每份标本都能养出来，每份标本都有个体差异，就是说很可能有的胎儿脐带活性很好，而有的活性就很低，还有就是脐带采集过程中有没有什么问题 比如采集后暴露在空气中时间过长 影响脐带细胞活性等。

hefan1234

回复 听不到 的帖子  @' n: j8 b) l" O* v; u

+ |9 p, Q: K* N, y+ i4 D" [用的是NUNC的塑料培养瓶，既然你以前倒置培养过夜培养很正常，那这次有什么变量因素吗？比如脐带来源个体是否正常，运输过程中温度、保存液是否正常，本次使用的培养液是否检测正常？

刘芳hh

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2 m  x2 H4 U; m: I. q1 W5 [8 n+ j+ s" Y6 x. m
有没有去除脐动脉？

deshenglll

回复 听不到 的帖子2 }. c8 I' f$ S: B' z
5 O: r% n) x9 q( J5 h# M0 ~; {
你的操作步骤我看了。不用倒置过来。这种倒置的方法早就过时了。你就把剪碎的组织块接种到瓶里（组织块大小合适，培养基添加量要合适），还有就是不用加什么双抗，用酒精消毒一下就行了。我都做了好几千份了，都没用过双抗，污染率挺低的。

听不到

回复 caustic 的帖子
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- Q6 o0 l1 G& i4 [我这次是一次性做了三个人的，所以我认为不应该是个体的问题，至于采集后应该是放在4度保存了，然后师弟去取的