CRISPR/Cas9

NANCYWHN

Clustered regularly interspaced short palindromic repeats( CＲISPＲ) / CＲISPＲ-associated ( Cas)系统是继锌指核酸酶( znic finger nuclease，ZFNs) 及转录激活因子样效应物核酸酶( transcriptionactivator-like effector nucleases，TALENs) 技术之后一种新的对基因组进行高效定点修饰的技术。这种系统是细菌以及古细菌在进化过程中形成的可以降解外来病毒或核酸的具有免疫以及调节功能的系统。CＲISPＲ/Cas 系统共有3 种类型，其中CＲISPＲ/Cas 类型II 系统最为简单，目前在研究中使用得也最广泛。野生型CＲISPＲ/Cas 类型II 系统由crＲNA ( CＲISPＲ ＲNA，crＲNA) 、tracrＲNA( trans-activating crＲNA，tracrＲNA) 以及Cas9 蛋白组成。其中crＲNA 识别入侵的同源序列，crＲNA∶ tracrＲNA 复合物结合Cas9蛋白并引导其对DNA 双链的切割。迄今，CＲISPＲ/Ca 类型II 系统在细菌、真核细胞( 包括人类细胞) 中的活性已经得到了验证。首先以CＲISPＲ/Ca 类型II系统为例介绍CＲISPＲ/Ca 系统的结构特点、作用原理及其在基因组定点修饰方面的作用，然后对该技术潜在的广泛应用前景以及可能存在的问题进行深入的分析。