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一般做实验用几代的脂肪间充质较好?? [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2015-6-18 18:21 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
看文献大部分说是3-5代,我做的大鼠脂肪间充质干细胞,感觉第5代细胞趴开来的挺多的,折光度也差了。。) J. |* W+ n7 |! B+ o6 u
所以问问大家一般用第几代做实验呀?
3 m8 F* Z8 ^, l9 u: x* w) J9 F: U! w0 {
另外,想请教下所谓80-90%confluence,是不是随意性很大,各自的感觉也不同??一般怎么找个衡量的标准呢??
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沙发
发表于 2015-6-19 09:35 |只看该作者
细胞跟培养条件有很大关系。一般说的3-5代,是普通培养都可以用的。具体要看你培养的细胞状态,比如增殖能力,分化能力,marker等是不是P3和P5一致。如果差很多,还是用P3比较好,越到后面细胞能力是下降的
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金话筒 优秀会员

藤椅
发表于 2015-6-24 09:10 |只看该作者
一般培养到3-5代就可以了,也最好是在这之间做实验,毕竟和所有细胞一样,到以后的代数的话,细胞无论状态还是活力都不是理想的
" c* m& o- ~! V8 y9 Z至于你说的80-90%confluence,就是随意性的,没有所谓的衡量标准,可以理解为细胞贴壁的面积占整个瓶底的比例,其实这东西就看个人了,根据平时传代时细胞量的多少,自己控制就好了
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板凳
发表于 2015-7-1 10:48 |只看该作者
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这要看你的实验目的是什么了,综合考虑,另外最好是实验摸索一下
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报纸
发表于 2015-12-24 12:00 |只看该作者
刚开始做实验可以问下实验室的学长学姐或老师,新开的课题没有经验的还是做下预实验摸索一下条件的比较好。
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地板
发表于 2016-1-26 11:46 |只看该作者
这个感觉看你后期的实验安排以及细胞的生长状况吧,如果你后期准备用这个细胞做动物体内实验,建议还是用3-5代的会比较好,如果只是单纯的做体外实验,细胞生长状态ok的话,到第十代应该也没啥问题的啦。当然咯,你如果不觉得原代提取麻烦的话,越早代次的细胞的状态当然是越好的啦。那个80-90%confluence一般应该就是镜下看贴壁的细胞占培养底面积的百分比吧。
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