请教如何预防原代大鼠脂肪间充质长长就铺开了？？

Cyclone2009

做了几批细胞，发现P0刚提出来的细胞很好，细长梭形。。后面传代就越来越肥，细胞铺开了。。有人说铺开了细胞状态就不好了，不建议用。。
3 s% _3 g$ {* T那怎么预防细胞铺开呢？; g7 \8 ?$ P4 X) ]
培养液是DMEM+10%FBS+双抗，没有加细胞因子。。消化一般是培养箱放1min，然后拍打中和，整个过程下来应该控制在2min以内。。/ X/ |& R& @' p% \% S4 g
求高手指点呀 , H3 j0 b( r0 C' f& w. o# t% C  `2 ]
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P0状态：3 W& d+ `3 U3 g/ b! L" ~/ l" x
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/ G" N1 s2 w0 Y# o% m& a3 l* v! GP3：状态是不是不太好？感觉铺开了
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avbn

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3 A, p. W2 d$ V7 Y/ Z" z  p, g" v, N* d2 Y, M; S
大鼠的细胞是不好养，随着传代会逐渐衰老，我们没有太好的方法只能尽快使用，估计可能与大鼠寿命短有关系