跪求肿瘤干细胞培养，细胞量很少

zian62562

我是想富集乳腺癌干细胞，MCF-7 和MDA-MB-231 干细胞，现在有常规的细胞株，采用无血清培养基培养：DMEM/F12，外加添加剂和细胞因子2%B27, 20ng/ml EGF 10ng/ml bFGF 。现在在25 cm2 培养瓶中培养，已经培养了20多天，有的传代下去，每瓶的细胞量上不去，基本上是在105次方个，有的还达不到这儿量。我想做流式，测定一下干细胞含量，可是需要106 次方细胞量，想问一下大家，能给我点意见吗？如果还这样养下去，我是估计我会疯， 拜托各位，帮我出出主意吧，好心人  ]. B! k9 `2 a" M3 e
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baby00000003

对肿瘤干了解不多，仅仅看过文献，印象里肿瘤干就是代谢增殖都很缓慢的，如果增殖加速就是“分化”的表现......- X4 a% t8 v/ p3 F# R
也许降低氧气浓度可以稍微加速增殖？个人直觉哈～

zian62562

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谢谢侬

lily132

同问，我做的也是，细胞量本身不多，每次消化传代时损失细胞很多，根本增殖不了。