间充质干细胞传代时细胞成片脱落是怎么回事？

sjh15123382094

细胞融合度过高，胰酶浓度过低，消化不充分，没有消化掉细胞之间的粘连，就会出现这种情况。
/ v# t& W! m- m解决方法：1.胰酶使用前复温至常温2 d0 L6 v1 [/ P0 W2 o; C* \% K
                  2.延长消化时间，期间置于显微镜下自然消化，勿外力干扰
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如果细胞生长状态正常，融合度高一点有时候会出现这样的问题，根据我的经验，建议你消化的时间不要太长，时间太长的话全部细胞一起脱落，加之细胞融合度又太高，所以出现絮状沉淀，肉眼可以很明显的看见，这个时候就需要用100微米的滤网过滤；另外我一般都是把0.25%浓度的姨酶稀释为0.125%来消化，这样对细胞的伤害小，消化能力不是很强容易把握，我从来不放到培养箱里面消化，都是将姨酶加入培养瓶后铺平，用手拍打瓶壁，边消化边观察，很容易就消化下来了，而且细胞变圆脱落的时间不一样，所以不会出现想你说的聚团脱落的现象，消化时间不会超过两分钟，这是我们的要求。希望对你有用

LVXUEYAN1101

片状脱落有可能是细胞老化了

独自等待

一种可能是消化时间过长，降低胰酶浓度试试，最好的方法是计活力怎样，再做流式检测，看细胞是否符合标准，如果细胞这些检测都合格，说明细胞没有问题。

lihaifengwl

1、细胞密度过高，叠层，细胞老化都有可能在传代的时候成片脱落
* @* f, s. j. @2、如果用摄像头记录这种过程，可以清晰地看到消化的细胞是被撕裂的，而不是缩成圆形，这种情况，胰酶浓度越低，越明显
# L6 S9 z4 [0 ~: `8 ]% ]3、撕裂处的细胞基本都是老化的细胞，即细胞间以及细胞与培养表面结合不牢靠，在消化的过程中，老化的细胞先被撕裂，如果同时两处较近老化细胞的撕裂，由于之间的作用力，会成片将好的细胞一并带起，成片脱落，这是我在显微镜下观察，并拍了视频看到的情况，但是我发现了一个问题，用无血清培养的MSC 未出现这种问题，而用血清培养的，密度过高后，出现的几率会增大。

五口二木

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- [% N3 B* |/ k: b0 \+ M# K! ]8 q$ M! S' Y. C; U5 b- e- H
我也遇到过这种情况，一般细胞长得很密，然后胰酶消化时间长一点就会出现片状脱落。我的处理方法是缩短消化时间，这样改善很多，很少有片状的了