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楼主: luoan
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CIK细胞培养过程中CD3+是先包被在培养瓶上好呢?还是在培养过程中加?   [复制链接]

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11楼
发表于 2015-8-10 16:53 |只看该作者
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回复 免疫与细胞 的帖子
; K; ]; ?8 n& d3 q( C' y% O& w- Y: }/ Q3 n+ ^! @( R* p. s
直接用PBS或你用的培养基包被呀,我们就10ML培养液加你要包被的因子或抗体,室温过夜。
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12楼
发表于 2015-8-10 17:02 |只看该作者
回复 luoan 的帖子
- J8 D" M( U3 }* T$ t. a  s' t3 R7 D
用CD3包被,浓度5μg/ml可以吗
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13楼
发表于 2015-8-12 15:30 |只看该作者
具体浓度不知道,用CD3+单抗包被过夜。
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14楼
发表于 2015-8-18 13:49 |只看该作者
用CD3加生理盐水或者pbs包被,冰箱24h,培养箱4h
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15楼
发表于 2015-8-28 13:55 |只看该作者
做过几次实验对比,不包被的效果好很多,原因:cik本身是悬浮细胞,不铁壁;细胞制备工艺上,是使用培养袋扩增的,包被不了。
& X: F6 n* A0 w2 F$ Q8 N9 w! g- o
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16楼
发表于 2015-8-31 09:22 |只看该作者
我们这边实验结果是包被和不包被情况差不多,另外包被也不是要CIK细胞贴壁生长,但是细胞会自然沉降,结团的时候更会如此,所以包被只是培养的手段之一,但是包被会浪费一些因子,考虑成本还是滴加的好。
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17楼
发表于 2016-5-30 11:25 |只看该作者
回复 cneagle66 的帖子" G8 x7 a4 H6 y  Y, S: n' c6 f

( P* Q6 b2 L% V6 d3 D$ j% B, i, x你好,想请教一下包被的问题。包被以后CIK会贴壁生长对吧,我们需要把上清倒掉吗,细胞还要消化吗?
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18楼
发表于 2016-5-30 11:52 |只看该作者
没试过包被的方法,一直使用的是未包被的方法,一般一份CIK养到15天的数量在5*10^9左右,不知道大家的到15天数量是多少,可以给与我们参考下
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19楼
发表于 2016-5-31 13:35 |只看该作者
不包被,过程中直接滴加
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20楼
发表于 2016-5-31 13:38 |只看该作者
本帖最后由 lingfei 于 2016-5-31 13:42 编辑
- K! g, q( A4 g: V# Z4 h
4 i( o8 P5 J) L7 C9 ?, R回复 18627000462 的帖子
) v9 `7 U, }- ]5 H( f) k' v6 c+ s1 y5 h1 D
细胞扩增后的数量也和开始培养时的细胞数有关,你15天的细胞数很多了,需要看扩增倍数的吧,你是怎么培养的?可以交流一下吗?
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