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楼主: 杏色玻璃
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无血清培养中终止胰酶消化   [复制链接]

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11楼
发表于 2015-8-13 13:35 |只看该作者
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回复 杏色玻璃 的帖子% C' j5 v% D, D
/ ~( A- W& e0 l' h# Y0 z' M6 r0 }
你可以就用你的培养基,但你动作快点。
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12楼
发表于 2015-8-13 14:52 |只看该作者
回复 jojo1988509 的帖子0 V3 F7 H$ b" q0 X

  ]! L4 y9 ^) o9 z# o# E9 V谢谢

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13楼
发表于 2015-8-14 09:57 |只看该作者
回复 nkcell 的帖子
. b& @3 t2 V' ^9 a' |4 Q. A
8 x# |. w  w" f1 o  P有试过至少要几次离心洗涤吗?
* j" e3 X) `/ L) ~. h4 ~. ~
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14楼
发表于 2015-8-14 09:59 |只看该作者
回复 杏色玻璃 的帖子
  i3 T6 W) f2 F
; }7 X% w& y" t* F1 K$ H( b没用的,你的意思就是不用终止,离个心就直接种瓶了,这里种瓶就有培养基了是吧,可是我试过这样做,细胞贴壁差,贴上也长不好。感觉无血清培养基里的蛋白对胰酶来说并没有什么LUAN用。
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15楼
发表于 2015-8-14 12:50 |只看该作者
清洗3遍就可以了,不会对细胞损伤很大
# V% N2 \+ y0 E$ X8 T: A
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16楼
发表于 2015-8-18 23:22 |只看该作者
应该加培养基就好了
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17楼
发表于 2015-8-25 10:29 |只看该作者
就用原培养基稀释,操作作稍微快些,然后洗个2-3遍就ok了!
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18楼
发表于 2015-9-22 12:45 |只看该作者
回复 杏色玻璃 的帖子% F+ f- a( i- X6 ]" ?
: ?4 q* ^; _# O6 G1 m
无血清培养的话,在胰酶消化后就可以用无血清的完全培养基终止,我一般都是1:1的量,然后加入PBS稀释,吹吸,离心两次,就可以了
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19楼
发表于 2015-9-22 12:46 |只看该作者
回复 qiqishichaoren 的帖子
8 Z( F3 {: W. h* |; U( k" z' L7 |1 u2 z- [/ z% k. f4 I, y# H
我用两次离心
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金话筒 优秀会员

20楼
发表于 2015-9-23 19:55 |只看该作者
不用买那些奇怪的抑制剂什么的,直接加培养基把细胞吹下来,之后离心弃上清就行。
/ e2 x2 C+ S- [, y( f. R2 Q5 D# N我以前也纠结过这个,总觉得不放心,直到有一次,我特别着急要稀释胰酶,但是恰好PBS没有了,就顺手拿了基础培养基稀释胰酶。  f9 G# |& H0 C* K7 C8 O
然后呢,稀释的胰酶根本就不好用,细胞一点都消化不下来。
* q5 a! i/ U* }/ f从此以后,我深刻的明白了有些缓冲液的无钙镁离子的要求,而且再也不纠结如何终止胰酶的问题了。
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