无血清培养中终止胰酶消化

jojo1988509

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你可以就用你的培养基，但你动作快点。

杏色玻璃

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谢谢

qiqishichaoren

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: e/ G; J; ^) \  H& j  q+ r: D$ c' j7 B% N5 a7 `3 p
有试过至少要几次离心洗涤吗？8 {, D4 K# P7 u) ?& K. l

qiqishichaoren

回复 杏色玻璃 的帖子) A% k5 y3 Q9 f- o2 G) E
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没用的，你的意思就是不用终止，离个心就直接种瓶了，这里种瓶就有培养基了是吧，可是我试过这样做，细胞贴壁差，贴上也长不好。感觉无血清培养基里的蛋白对胰酶来说并没有什么LUAN用。

nkcell

清洗3遍就可以了，不会对细胞损伤很大
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飞飞飞

应该加培养基就好了

帝国黑骑士

就用原培养基稀释，操作作稍微快些，然后洗个2-3遍就ok了！

309208770

回复 杏色玻璃 的帖子4 i6 V8 M  l8 H' J7 N( a1 `8 y
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无血清培养的话，在胰酶消化后就可以用无血清的完全培养基终止，我一般都是1:1的量，然后加入PBS稀释，吹吸，离心两次，就可以了

309208770

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: E7 a, n8 D, f6 t7 X- {8 |我用两次离心

edwardellen

不用买那些奇怪的抑制剂什么的，直接加培养基把细胞吹下来，之后离心弃上清就行。1 F$ I& v5 Y( O1 ?2 e4 H1 p
我以前也纠结过这个，总觉得不放心，直到有一次，我特别着急要稀释胰酶，但是恰好PBS没有了，就顺手拿了基础培养基稀释胰酶。
2 y5 O! W+ l8 p然后呢，稀释的胰酶根本就不好用，细胞一点都消化不下来。
. W( |, |: g. g) g5 e从此以后，我深刻的明白了有些缓冲液的无钙镁离子的要求，而且再也不纠结如何终止胰酶的问题了。