小鼠胚胎干细胞E14分化了怎么办？

keyixiaozhu

第一次养mES细胞，用的是feeder free的体系。从液氮里拿出来的时候是第五代了。复苏到35mm盘子之后细胞浓度太大，复苏第二天就转到60mm盘里面了。第二天看到细胞呈克隆样，在贴壁的部分有少部分分化细胞。第三天再传的时候，在无明胶包被的板子上先放了2h，想去除分化的细胞。可是两个小时之后，在显微镜下面看发现好多都贴壁了。晃动细胞盘都动不了。只好又吹打了几下，分在两个有明胶包被的盘子里。没包被明胶的盘子也加了培养液一起培养。第四天再看细胞，有明胶包被的就完全变成单层细胞，形态全部是分化了的样子，像是培养了一盘癌细胞似的。没有明胶包被的倒还有一坨坨的细胞。老板说让加点2i。跪求大神指点！！

iseeyou1210

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