流式细胞分选--不同荧光波长选择

zzyhelixinxin

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各位大侠，有个问题想请教，我使用两株带不同标记的慢病毒，一个是带绿色荧光的，一个是带红色荧光的，两种慢病毒同时感染目的细胞，通过流式细胞仪进行分选稳定细胞株，有谁晓得，波长如何确定？跪求：红光波长范围，及绿光波长范围~

cyz3057

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8 s, u+ n3 I$ n% b/ T回复 zzyhelixinxin 的帖子
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1 O7 X3 p8 z) y+ Z% q7 H2 F请问楼主的意思是带有两种不同标记的慢病毒 是分别转染细胞 还是两个一起转染细胞？

zzyhelixinxin

回复 cyz3057 的帖子& }, {( U) i" ]6 q
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两个分别感染，先使用一种病毒，感染后，流式稳筛，波长，再感染一株病毒后，再稳筛

cyz3057

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3 q* ^! \* n* G哦 大概懂得楼主的意思是， 你是想双转染 ，这样理解 ，比如你先转入带绿色荧光的病毒 ，那么选择流式抗体的话 ，就不能选择绿色荧光标记的流式抗体， 简单理解是这样会造成误差 ，结合你要上的流式机子的类型 ，比如我们在的实验室是BD的一种， 四通道 ，可以检测常用的四种光 APC pe fitc 以及percp-cy5.5，分别为红光 黄光 绿光及远红。建议你先了解一下你们的流式细胞仪，鉴于你后面还要转带红色的病毒，所以在转绿色病毒的时候，就不要选红光的流式抗体了，会对后面的实验造成影响。最近我也在做流式，可以相互学习，加油。