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楼主: 免疫与细胞
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免疫细胞培养内毒素检测取样及合格标准   [复制链接]

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11楼
发表于 2015-8-13 11:50 |只看该作者
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回复 免疫与细胞 的帖子, S" v) T, }/ K2 K: o
9 U  _* t6 {$ j9 i, u& T1 P# |1 t! G
如果是回输用的,建议还是取最终产品作为检测样,离心洗涤是可以降低内毒素水平的,但洗涤前后没有绝对的对照关系,因为细菌内毒素本质上是一种脂多糖分子(LPS),它在水相中的分布并不是均匀的
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12楼
发表于 2015-8-15 18:41 |只看该作者
一般生理盐水是无菌,内毒素达标的,可以忽略不计,因为如果你做实验遇到生理盐水内毒素不合格,那就很麻烦,说明他们厂家的那批大输液都会有问题,不是你实验的问题,而是整个医疗的事故,用过这种生理盐水的病人都会感染,所以,你检测内毒素就在病人回输细胞时检测内毒素最恰当,注意自己的操作和器械的消毒灭菌哦
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13楼
发表于 2015-8-17 09:28 |只看该作者
谢谢,您的意思是取最终细胞悬液做内毒素检测,那请问悬液是否要离心去除细胞后再进行检测吗?还是可以直接检测?您有这方面经验吗
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14楼
发表于 2015-8-17 10:52 |只看该作者
回复 免疫与细胞 的帖子; r, [0 @7 b' {
9 D* ?% A. W# q1 A3 F! X: F; @
你回复谁 就点击对方回复帖子中的回复按钮 然后输入内容 像我这样
3 j& B% H( p. U* F& I  Z
/ o/ `- s; ]) |否则他会看不到

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15楼
发表于 2015-8-17 13:27 |只看该作者
不需要去除细胞,就是从细胞悬液里取出100ul做就行,如果让别人检测的话送他们1ml就行,避免他们操作失误没有样本,没法复测.
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16楼
发表于 2015-8-17 15:40 |只看该作者
回复 细胞海洋 的帖子
# I  _8 x& G( b/ e7 r7 g5 u$ h2 w" e
6 B7 K+ [) p1 F7 X0 e) e好的,谢谢

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17楼
发表于 2015-8-17 15:43 |只看该作者
本帖最后由 免疫与细胞 于 2015-8-17 15:44 编辑 . F8 g# [2 [0 l7 Z/ S
: Z% Z6 M2 ~! t2 k4 O2 k8 b3 M4 ?4 O- T
回复 小刘 的帖子$ x0 `5 z# B& o& z7 C: S. A

& Q0 F0 d+ d- Q8 c% A8 D5 o# [3 P1 o您有实操经验吧!,我们没这么做过,所以比较担心

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18楼
发表于 2015-8-17 15:54 |只看该作者
回复 元杰5 的帖子
& k. c1 {, c3 K+ }0 i2 x0 t) {0 g  U3 [# o. R
有些人回输细胞会加入其他的一些蛋白类的添加剂,按照你的说法,检测的和回输的完全一样的理论,但是加了蛋白以后就有干扰了,这种情况您是怎么处理呢?
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19楼
发表于 2015-8-17 16:01 |只看该作者
回复 免疫与细胞 的帖子
6 T+ ~* `  a, K
1 o9 K+ A, e5 u0 V3 g. k8 ]: P如果生理盐水洗涤降低了样品内毒素水平岂不是更好,如果细胞多的话可以取细胞(生理盐水)悬液,没问题的,我做过,没干扰!此外即使生理盐水上清不能完全表示样品里的内毒素水平,但是也应该近似吧,不会差很多,之前已经说了,我们的标准比实际计算的标准严格3倍呢,我觉得这个在可接受的范围内!如果你的细胞很珍贵,那么采用这种方法可以提高回收率啊
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发表于 2015-8-17 16:41 |只看该作者
回复 colins 的帖子
: E3 r5 |7 e( b5 I7 |% J, B" I0 u
  Y6 n8 d: }7 ]3 z7 \& b# ^加了添加剂的话,所谓“终产品”就是加了添加剂后的样品。同样,回答19楼的问题,注射进人体的东西不可马虎,虽然我们会设一个较为严格的标准,在理论上不会有危险,但如果真要达到临床注册的标准的话,必须是终产品取样。
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