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楼主: simed
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DC细胞培养求助     [复制链接]

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11楼
发表于 2015-8-26 14:55 |只看该作者
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回复 鸵鸵 的帖子! B0 R4 q! |. d+ q
! c2 O5 p# }" s2 K; A: S9 H# T
可以用流式细胞仪检测一下,积累辨别经验。为减少细胞损失,可以分多次补加细胞因子,或者如楼上所建议,采用半亮或1/3换液的方法,具体量视原细胞培养液消耗状态而定,不见得必须按具体时间换液。
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12楼
发表于 2015-8-26 14:59 |只看该作者
CIK细胞是外周血单个核细胞分离所得,从梯度离心后的白膜中取得,经再次洗涤、离心、重悬后得到,所以楼主所提及的杂细胞主要源自于该步骤操作,小心吸取白膜,同时培养过程中DC会随着自身成熟度的改变慢慢悬浮起来,这时候收集到的基本就是成熟的DC细胞了,但还是会有一部分DC贴壁。
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13楼
发表于 2015-9-7 17:46 |只看该作者
回复 鸵鸵 的帖子5 L& |0 E/ M* c/ D! ?; C# H- q; W
* {5 ^7 k) a. ^/ `, c' ?
DC细胞一般不会增殖,再说DC细胞的功能决定了它也不是以量取胜的,它相当于是雷达负载抗原给体内原有或者输进去的T细胞指引方向的;因为增殖能力较弱,可将换液改为半量补液,上清中的悬浮细胞离心收集后再添加到培养体系中;DC细胞不是一群纯的细胞系,它是以成熟DC为主的混合细胞,所以需要用流式指标来检测其纯度。
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14楼
发表于 2015-9-8 09:09 |只看该作者
回复 暖羊羊 的帖子
7 c" W! S! q. ^$ C7 n/ T
: i; K/ [& T1 l% i+ e多谢赐教啦; R1 I- e. K" k
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