CIK贴壁并变成了长梭形

mkhorse

说不定，会有意想不到的结果呢

teahouse0802

回复 小刘 的帖子6 N: f% u% |% j( U7 y. b
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如果参数设置的是转速，由于力矩不同有可能出现离心效果不一样。但你说的参数是离心力800g 10min，离心效果不同是什么原因呢？

bukuro

PBMC培养第二天细胞基本都贴壁了，这很正常嘛。您为什么会有疑问呢7 e/ Y( }: w5 S3 g, o
PBMC里的细胞，包括T细胞都是微微贴壁的。平常说T细胞不贴壁，那也不能说是错的。不过，只要您不作弄她，显微镜下看，她还是微贴的，有时她还怕孤单，会抱团。
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第三天发现贴壁的T细胞多数已变成长梭形，您这种说法是错误的。让我怎么说您好呢。不管多厉害的T细胞也不会变成长梭形。除非您产生了误会？
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让我猜猜您为什么会产生误会。% {3 U: n$ D5 y: r0 D
我想您怕是误会了PBMC等于Lymphocyte吧？; m0 m1 |5 w5 M0 u6 l, r5 K4 Q
其实PBMC是个多元化的东西。复习一下下面这个流式图吧。路人甲的PBMC，您要培养的目的细胞是淋巴细胞吧。她在PBMC里含量很少，少到就那么一小撮。不光路人甲这样，每个人都这样。平常作体检的时候，问问医生就知道啦。
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( k; F! I, M. q5 p刚提取的PBMC,因为您反复的清洗操作，不管是贴壁的单核细胞，还是不贴壁的淋巴细胞，都不会马上贴壁，看起来圆圆的，模样都一样。您是不是以为这些都是淋巴球？那可不是阿。: W4 W2 q3 b) ~' H( s/ Q7 f
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看您培养液里加的东西，短时间内不会让淋巴球之外的细胞死亡，长期培养后，大部分就只剩下淋巴细胞了。
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你再多养两天就看出不一样了。单核球和颗粒球会慢慢消失，如果不消失，那就换换培养液吧。! z$ a2 ?; V: M$ z2 Q5 \, b

$ f9 }0 B( |; s, {6 c: h另外，我看您提PBMC的图，平常真这么操作吗，是不是太能作了，就不能干净点吗？
7 i+ ~$ |, _1 w" R. G: ?如果不把实验当成一种艺术，那最少也要求其漂亮。拜托了。
$ v) x+ S; L# {6 i! q& Z

momoenn

回复 bukuro 的帖子2 Z$ A5 l' @. H  h
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我是来膜拜的

暖羊羊

有没有可能向Ficol淋巴细胞分离液中加液的时候加的太快了，而冲破了界限呢？我感觉这步是个细致活。如果离心机没问题的话，还有一个可能就是病人的个体差异，血液状况不佳。
; n5 T" c' Z7 h1 o# R* F  z另外单核细胞（DC细胞、巨噬细胞的前体细胞）在CIK的培养体系中生长不占优势，及时带进去一部分杂质应该也不会这么大的比例。

teahouse0802

回复 bukuro 的帖子% P6 o4 y  u5 {4 P1 R

5 t+ U( W$ s' e6 C赞一个，尤其是后面说的操作要漂亮，做实验就像是做一件艺术品。我刚开始做细胞的时候就觉得带我的组长，手在操作台里就跟能跳舞似的，做出来的东西也特别的清晰漂亮。

cheeray

估计单核细胞比例大。

鸵鸵

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如何排除患者血液不好这种情况呢？平常也会遇到特殊情况

鸵鸵

回复 刘艳85 的帖子
# k4 }$ c5 y4 r: [' \8 t" ?* k% p; g! g4 C! g3 M! ~- t- D
那怎么排除是患者血液质量不好的情况呢？

鸵鸵

回复 teahouse0802 的帖子7 k1 U* o8 a6 k/ v* I6 n- u2 [
) X7 q/ i/ y1 e7 v
那怎么样辨别这些情况呢，是否溶血了？