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CIK贴壁并变成了长梭形   [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2015-8-14 00:28 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
机采外周血分离的时候不分层,血清与分离液混合看不到分界,无细胞层出现,细胞混悬在液体中,只有部分红细胞沉淀。做CIK培养,培养第二天细胞基本都贴壁了,第三天发现贴壁的T细胞多数已变成长梭形,在此之前培养液中加了CD3、IL-2,附图,请有经验的大神帮忙分析下是怎么回事,多谢!6 y6 E: g8 |( o7 m; W
PS:病人病情是右小细胞肺癌四期,目前已不做其他治疗,采血前血常规指标多项不合格,比如白细胞是13.6·····等等,不知道这是不是导致这个结果的真正原因?跪求大神帮忙!!!!
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沙发
发表于 2015-8-14 00:31 |只看该作者
本人做CIK细胞4年,第一次出现这样的情况

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藤椅
发表于 2015-8-14 08:23 |只看该作者
从离心之后细胞聚集的形状看,有没有可能是离心的时候加速减速过大?
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板凳
发表于 2015-8-14 10:32 |只看该作者
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你培养了4年的细胞,如果和以前的操作没有什么区别的话,那么应该从患者身上找原因,贫血、溶血之类的都有可能。
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报纸
发表于 2015-8-14 12:55 |只看该作者
是不是离心的转数过大
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地板
发表于 2015-8-14 13:01 |只看该作者
那应该是病人自体细胞的问题,你可能吸取的杂质细胞太多,导致里面的杂细胞生长较多,如树突状细胞等,如你图所示,你那个是典型的离心参数不对,离心机与离心机之间也有较大的差距,注意校准参数。
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发表于 2015-8-14 13:30 |只看该作者
应该是患者本身的血液质量不太好
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发表于 2015-8-15 11:07 |只看该作者
回复 小刘 的帖子) y& c# [  U6 }; F/ P
6 H$ Z8 |  T' z. ^; z
他已经做了4年的细胞培养了,相信不会出现离心机参数不对的情况。而且,他也并没有提到使用了新的仪器设备。
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发表于 2015-8-15 11:17 |只看该作者
回复 teahouse0802 的帖子2 e, W7 p4 Z1 s  }& M9 x
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我说的是离心机,就像久保田和thermo 厂家一样 同样是800g 10min 但是离心的效果就不一样,我有这经历,不是做的时间长短,而是工作中有没有细致程度,呵呵
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发表于 2015-8-15 16:44 |只看该作者
分离之后,有没有用血细胞分析仪计数呢?估计是淋巴细胞所占比例偏低,而单核细胞所占比例比较大的原因吧。所以镜下看的话巨噬细胞和树突细胞的前体细胞比较多。没关系,再养几天看看,应该是没问题的
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