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楼主: 乖乖咪咪
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CIK贴壁并变成了长梭形   [复制链接]

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11楼
发表于 2015-8-15 16:45 |只看该作者
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说不定,会有意想不到的结果呢

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12楼
发表于 2015-8-17 15:21 |只看该作者
回复 小刘 的帖子
( v5 G+ h6 A: ^( b' w2 R. N/ u6 T% n, _' Y
如果参数设置的是转速,由于力矩不同有可能出现离心效果不一样。但你说的参数是离心力800g 10min,离心效果不同是什么原因呢?
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优秀会员 金话筒

13楼
发表于 2015-8-18 10:11 |只看该作者
PBMC培养第二天细胞基本都贴壁了,这很正常嘛。您为什么会有疑问呢
+ Y+ c# }/ [$ p9 U; u$ C/ P! ePBMC里的细胞,包括T细胞都是微微贴壁的。平常说T细胞不贴壁,那也不能说是错的。不过,只要您不作弄她,显微镜下看,她还是微贴的,有时她还怕孤单,会抱团。
- F+ z& z8 [5 a0 z( m& E
& G; _& p. H+ t' u3 K# n, ^, g9 s第三天发现贴壁的T细胞多数已变成长梭形,您这种说法是错误的。让我怎么说您好呢。不管多厉害的T细胞也不会变成长梭形。除非您产生了误会?/ A1 d! J" L' K# z) c

" ~) F, ~- i; c. p1 C4 Q3 r  S让我猜猜您为什么会产生误会。
* s& N' ^( L5 m( {# J我想您怕是误会了PBMC等于Lymphocyte吧?4 p0 G) o8 E1 D1 r# X, [+ g
其实PBMC是个多元化的东西。复习一下下面这个流式图吧。路人甲的PBMC,您要培养的目的细胞是淋巴细胞吧。她在PBMC里含量很少,少到就那么一小撮。不光路人甲这样,每个人都这样。平常作体检的时候,问问医生就知道啦。! M+ r& Q  C1 g7 v, N! Q

( A0 U( K# l- L! W& K1 O9 j* n6 b+ k8 V0 ?' f9 F) f
刚提取的PBMC,因为您反复的清洗操作,不管是贴壁的单核细胞,还是不贴壁的淋巴细胞,都不会马上贴壁,看起来圆圆的,模样都一样。您是不是以为这些都是淋巴球?那可不是阿。/ Q% p  n1 X: p) V! A. a
+ w/ ~) W% Q3 Z3 x. b$ y
看您培养液里加的东西,短时间内不会让淋巴球之外的细胞死亡,长期培养后,大部分就只剩下淋巴细胞了。' J( t6 `9 }) g$ r: a; M8 T* i
& u7 B: G5 y1 a& J5 o
你再多养两天就看出不一样了。单核球和颗粒球会慢慢消失,如果不消失,那就换换培养液吧。/ T& E8 O. y! `

/ `$ d$ X1 Z! z3 C# }1 |2 \另外,我看您提PBMC的图,平常真这么操作吗,是不是太能作了,就不能干净点吗?% c; X. Y5 y+ @
如果不把实验当成一种艺术,那最少也要求其漂亮。拜托了。
" s1 W: h5 F; j' A+ t
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14楼
发表于 2015-8-18 11:12 |只看该作者
回复 bukuro 的帖子
* `% k5 t! A2 W/ {. V( i
  [. S  A( ~9 R% e& Q6 G- C我是来膜拜的

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15楼
发表于 2015-8-18 15:31 |只看该作者
有没有可能向Ficol淋巴细胞分离液中加液的时候加的太快了,而冲破了界限呢?我感觉这步是个细致活。如果离心机没问题的话,还有一个可能就是病人的个体差异,血液状况不佳。% J- E4 ]( U0 x& J3 U
另外单核细胞(DC细胞、巨噬细胞的前体细胞)在CIK的培养体系中生长不占优势,及时带进去一部分杂质应该也不会这么大的比例。
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16楼
发表于 2015-8-18 16:00 |只看该作者
回复 bukuro 的帖子
1 Z) F% y' O2 ~; }
& @# |3 L! F. b6 i赞一个,尤其是后面说的操作要漂亮,做实验就像是做一件艺术品。我刚开始做细胞的时候就觉得带我的组长,手在操作台里就跟能跳舞似的,做出来的东西也特别的清晰漂亮。
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17楼
发表于 2015-8-18 17:09 |只看该作者
估计单核细胞比例大。
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18楼
发表于 2015-8-20 16:29 |只看该作者
回复 刘艳85 的帖子, {1 L2 @: F1 V6 A% W
" v0 C: Z( s" e+ h2 I. L* J
如何排除患者血液不好这种情况呢?平常也会遇到特殊情况

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19楼
发表于 2015-8-20 16:30 |只看该作者
回复 刘艳85 的帖子
# h' A8 I) [1 D. ^
+ _9 O. k9 ?/ H/ x' F那怎么排除是患者血液质量不好的情况呢?

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20楼
发表于 2015-8-20 16:31 |只看该作者
回复 teahouse0802 的帖子
. G, Q& t% q! Q9 {+ n2 C
) ]9 ~$ h2 ~5 ?1 W那怎么样辨别这些情况呢,是否溶血了?
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