CIK贴壁并变成了长梭形

mkhorse

说不定，会有意想不到的结果呢

teahouse0802

回复 小刘 的帖子- Q* O  r) C( ~& ?3 T) G6 u+ Q, ]
& y: B' c7 W$ r6 @1 i, d, V
如果参数设置的是转速，由于力矩不同有可能出现离心效果不一样。但你说的参数是离心力800g 10min，离心效果不同是什么原因呢？

bukuro

PBMC培养第二天细胞基本都贴壁了，这很正常嘛。您为什么会有疑问呢
3 ]2 @( r  `! r5 yPBMC里的细胞，包括T细胞都是微微贴壁的。平常说T细胞不贴壁，那也不能说是错的。不过，只要您不作弄她，显微镜下看，她还是微贴的，有时她还怕孤单，会抱团。2 N* t) K* z9 k8 g( B
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第三天发现贴壁的T细胞多数已变成长梭形，您这种说法是错误的。让我怎么说您好呢。不管多厉害的T细胞也不会变成长梭形。除非您产生了误会？5 b" X" @$ n" d/ i2 }+ b0 `- a

1 g; o) [! P' k3 e; X让我猜猜您为什么会产生误会。0 k+ s2 C3 c' G0 J
我想您怕是误会了PBMC等于Lymphocyte吧？  k0 ^/ K2 p) J7 j  c
其实PBMC是个多元化的东西。复习一下下面这个流式图吧。路人甲的PBMC，您要培养的目的细胞是淋巴细胞吧。她在PBMC里含量很少，少到就那么一小撮。不光路人甲这样，每个人都这样。平常作体检的时候，问问医生就知道啦。
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刚提取的PBMC,因为您反复的清洗操作，不管是贴壁的单核细胞，还是不贴壁的淋巴细胞，都不会马上贴壁，看起来圆圆的，模样都一样。您是不是以为这些都是淋巴球？那可不是阿。- n# o4 w& d) ?7 c# t9 T7 Q
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看您培养液里加的东西，短时间内不会让淋巴球之外的细胞死亡，长期培养后，大部分就只剩下淋巴细胞了。; _" Y5 \" P; ~( m! Y* s' n- r2 u
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你再多养两天就看出不一样了。单核球和颗粒球会慢慢消失，如果不消失，那就换换培养液吧。
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7 ~$ s5 x+ p; R! `6 K另外，我看您提PBMC的图，平常真这么操作吗，是不是太能作了，就不能干净点吗？0 V) e+ O9 x! k$ A9 P
如果不把实验当成一种艺术，那最少也要求其漂亮。拜托了。* D2 _8 C  O- B% A$ w5 |; v- k

momoenn

回复 bukuro 的帖子
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6 q) J; z. q8 N* Z  w9 u" w3 p我是来膜拜的

暖羊羊

有没有可能向Ficol淋巴细胞分离液中加液的时候加的太快了，而冲破了界限呢？我感觉这步是个细致活。如果离心机没问题的话，还有一个可能就是病人的个体差异，血液状况不佳。7 C. R+ l/ Q" z  u# f
另外单核细胞（DC细胞、巨噬细胞的前体细胞）在CIK的培养体系中生长不占优势，及时带进去一部分杂质应该也不会这么大的比例。

teahouse0802

回复 bukuro 的帖子% s( i  S$ G+ ^$ h" Z/ m/ b

  R: S6 J7 Z) E) U! c赞一个，尤其是后面说的操作要漂亮，做实验就像是做一件艺术品。我刚开始做细胞的时候就觉得带我的组长，手在操作台里就跟能跳舞似的，做出来的东西也特别的清晰漂亮。

cheeray

估计单核细胞比例大。

鸵鸵

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9 T! ~# O/ N9 H9 u3 b" ?) y, S! ]% a9 J0 Z7 c' P$ q! A; B
如何排除患者血液不好这种情况呢？平常也会遇到特殊情况

鸵鸵

回复 刘艳85 的帖子3 A: \6 V$ k3 [$ H

4 L/ d  ~  l- D+ u那怎么排除是患者血液质量不好的情况呢？

鸵鸵

回复 teahouse0802 的帖子' c$ [$ i% E8 Z% E) }

' N3 }/ V0 E6 D# y4 w. f1 n那怎么样辨别这些情况呢，是否溶血了？