关于免疫细胞回输数目

泥饭碗略知

外周血是单采的还是直接全血？ficoll可以复分离一次，提高纯度，前期培养密度要相对高一些，前期长起来后期就没问题！单采仪获取的标本我还么有碰到过没培养起来的

鸵鸵

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" q; R) G7 r! `4 X
9 z& m8 _" t. V, s: a外周血是直接全血，你说的ficoll复分离要怎么做啊，是把第一遍ficoll的细胞吸出来后用PBS稀释到和ficoll1：1然后离心吗？因为用全血做的话细胞本身得率就不高，这样复分离一遍的话，会不会又浪费了ficoll也浪费掉一部分细胞啊?培养密度高的话要达到多少呢，太高的话可能就只需要加一点点培养基了，不知道你们平常全血做出来的细胞数目能达到多少啊，求指教

泥饭碗略知

1，重复分离确实比较少用到，不过可以尝试下，实验么，我那时候也只会对极少部分分离后分层不明显或者带红色的再分离一下。* F+ y+ K4 a1 R: a
2，我以前培养浓度为1x106个/ml，全血得到细胞量不多，我记得重悬培养基一般都在100ml左右，80、90居多。你可以提高到2x106个/ml，单采血我们最高提高过10倍，Day1，100~200ml重悬。
: }5 c/ @7 u. ~3 ~' Y, n3，培养14天回输，外周血扩增后达不到10次方，4-8吧。
/ _8 I) f3 {/ X3 }) z- v希望有帮助

鸵鸵

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4 E  d. |, \: r6 k, _* `9 J, o& T! O
好的，谢谢啦

riverdtang

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, @/ F7 }7 b3 m: p# w
# u$ R* ]8 Y" z* H" o补液密度2*10^6，调整密度5*10^5--1*10^6左右，培养14天，基本能到10的10次方

xnyyswzl

1*1010

星空雾雨

回复 riverdtang 的帖子9 Q& @$ Q' `' n& D3 I
4 U$ @) j  _+ f
你好 请问你说的补液后的密度是5*10^5--1*10^6还是2*10^6，我是隔一天补液 因子的浓度是多少？

312473313

一般十四天回输，基本都能达到10的10次方，实在达不到可以推迟一两天，我觉得补液时要注意观察细胞状况，控制细胞达到合适的密度再补

小馬

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$ t: a2 F3 V' X# }. p4 {; \4 G, i
没必要一天补一次

星空雾雨

回复 小馬 的帖子9 D. I3 r- B" L" N8 I2 b& Q) i5 [

0 U6 o# C( S: x$ h6 R7 w( M隔一天补一次 不是一天补一次