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楼主: 张荣华
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脐带血CIK细胞的详细制备及培养过程 刚开始做希望大家多多帮忙   [复制链接]

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21楼
发表于 2015-8-28 09:29 |只看该作者
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回复 鸵鸵 的帖子
( h1 o# |; F5 L! m/ |" Y; T# @9 }/ z# |' O  H2 a
请问你那里有没有CIK细胞状态好的图片啊!最近养的都不好,都不只好的细胞是啥样的,最好就是不同时间段的。

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22楼
发表于 2015-8-28 10:01 |只看该作者
回复 张荣华 的帖子
- C/ t2 `& u$ q) e7 j! u
1 G; v. n( N3 J1 d3 ]. b/ P10的6次方每毫升,用的什么抗凝剂?7 z' j0 d) ]5 S7 p% i2 a# S8 t0 v
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23楼
发表于 2015-8-28 10:34 |只看该作者
脐血DCIK把握两个点就行,一个是第二部密度梯度分离的离心参数,一般20分钟 800g或者900g,根据脐血的粘稠度确定,这个就需要经验了,第二个是接种密度,一般脐血的细胞数量较多,接种量不能太多,一般接种密度根据实际计数情况的一半为宜,只要把握好,脐血的增值数量好的很,还有个小诀窍,脐血培养用好点的培养基,如TAKARA 的H3 营养丰富,适合脐血培养,一般的1640根本不行,望采纳
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24楼
发表于 2015-8-28 11:00 |只看该作者
回复 hengton 的帖子/ C3 K. \/ r) U# d" ]
: R5 U2 S; u' a
还想请教你们血浆的离心速度、时间及温度

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25楼
发表于 2015-8-28 11:02 |只看该作者
回复 chenguangyu 的帖子
+ C1 d! b) m7 x! b7 r
. b, `: _, X8 j) f0 U用的拘橼酸钠

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26楼
发表于 2015-8-28 11:03 |只看该作者
回复 小刘 的帖子
' U( f9 p7 v6 C6 \: b
+ x+ @6 {7 ^. }" E* f/ i* D" a我么用的是GT-T551  这个培养基好吗

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27楼
发表于 2015-8-28 11:07 |只看该作者
回复 小刘 的帖子% U# K# I2 U2 C& P9 ~1 h

  z+ a# k( @3 T1 D3 |还有就是你说的:一般接种密度根据实际计数情况的一半为宜,是说如果我计数是4x107/ml,那我接种的时候就应该是2x107吗
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28楼
发表于 2015-8-28 12:22 |只看该作者
GT-551可以用,这个一般,用它的升级版就是H3了,一般在6x107/ml最好,你说的那数量太低了,脐血不可能那么点
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29楼
发表于 2015-8-28 13:51 |只看该作者
回复 小刘 的帖子6 ^3 T: U* G4 x! J+ W

2 i) Y2 x$ j2 Z6x107是接种密度吗

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30楼
发表于 2015-8-28 15:02 |只看该作者
6-8都行,你要根据实际的计数量来决定,问题还要看你的种瓶体积,加入75瓶中的培养基的量,工艺不同加的量也是不一样 的哦
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