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go

有谁在Cover glass上养过mESC吗? [复制链接]

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包包
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帅哥研究员

楼主
发表于 2015-8-26 14:33 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
最近我打算做免疫荧光染色,在Cover glass上培养ESC,用poly-lysine 泡过的,第一天细胞都贴下去了~结果第二三天都全漂了,有谁知道为什么活着解决方法吗?5 m) u& m4 Z* K4 B3 A  Z
谢谢了~~
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沙发
发表于 2015-8-27 21:02 |只看该作者
回复 yylhxylong 的帖子% N& A1 G- K4 Q# \- J) a: b# m

# I& G" \7 U' R根据很多文献,贴壁生长的ESC好像选择PDL/Laminin或者Matrigel比较好,我个人是用Matrigel成活率比较高,虽然也会出现细胞漂起死亡,不过我个人觉得很大程度是由于细胞接种下去已经状态不是很好了,或者是笑话过度,或者是处于凋亡中,所以coating应该不是导致细胞漂起来的主要原因吧。另外,操作过程也很重要,比如接种密度等等。总之,这个过程还是需要自己慢慢摸索,积累经验。我也是纠结了很久才能得到几张好看的荧光片子。
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