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一一

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楼主

发表于 2015-9-16 12:49 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

我采用1ug/ul的CD3和0.5ug/ul的CD28包板4°过夜，但是细胞接种后，T细胞活化的不好，可以活化，但是很慢，要很长时间。首先我用的样本是患白血病的，是PBMC冻存复苏的，但有些病人可以，有些就不行，关于T细胞的活化，有哪些因素会干扰，或者实验操作要注意的问题？

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a123567

新手上路

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沙发

发表于 2015-9-17 08:10 |只看该作者

想问一下你的培养体系多大的容器培养，培养基添加多少？个人觉得你的包被因子量可能过少，及添加的生长因子不足；而PBMC冻存复苏的话，细胞本身活性也会受到影响，会下降，所以活化减慢。

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一一

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藤椅

发表于 2015-9-17 12:45 |只看该作者

本帖最后由一一于 2015-9-17 12:46 编辑 " {, o! p! A; ~# s2 u
' M; Q- W, e' N5 G6 h: x' c
复苏后先将近2*10的6次方接种，隔天用24孔板活化，培养基也就1ml吧，生长因子添加的是IL-2

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chenguangyu

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板凳

发表于 2015-9-17 15:35 |只看该作者

1ug/ul的CD3和0.5ug/ul？？？确定没写错？

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小刘

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报纸

发表于 2015-9-18 16:35 |只看该作者

可以多采一管血，增加免疫细胞数量

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wuhuaguo88l

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地板

发表于 2015-9-19 06:48 |只看该作者

CD3和CD28也可以37℃孵育2小时，当然和4℃孵育过夜差不多，1ug/ml的CD3和1ug/ml CD 28

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7楼

发表于 2015-10-12 09:28 |只看该作者

回复 chenguangyu 的帖子8 A$ n) n6 V, r% ]3 E; h, M/ X

呵呵，写错了，单位是ug/ml

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