CIK细胞培养0、4、7、10、14天分别是什么样的？

本心

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: u' U( ]3 z9 b" C; Y2 E& ~6 p: @* |; c  J5 Y1 `
可以在D7加

ganggangtry100

CIK细胞培养0、4、7、10、14天分别是什么样的？？4 X% b- Q: O3 ?+ Q" }1 w2 l5 d
个人觉得应该从两方面来说：" Z1 B0 o; p/ P. S
1、细胞形态的改变
# ]- d/ l# J1 f) n* J      红细胞、单核细胞等杂志逐渐减少，细胞由圆形变成不规则较长细胞
/ |8 n9 A# Y! A$ v* x  D2、从细胞表型上
( Z# Z/ I# ^3 c; o) v0 i    随着抗体CD3的加入，培养中的CIK细胞的 CD3+细胞会从起始的20-30% 很快变为 90%以上，由于IL-2、干扰素等因子的加入，CIK的主要效应细胞CD3+CD56+细胞也会从原来的1%左右慢慢变为30-70%左右。# }' l/ y5 q/ i, v2 C* }# f; w- |4 @; m
   概括起来，CIK从原来0天的红细胞、粒细胞、单核细胞、淋巴细胞等一群复合细胞，变为以CD3+为主的一群异质细胞。2 H; X' z6 u! a+ q; k8 l+ r& p
   

地球外世界

回复 ganggangtry100 的帖子8 ^) [2 L( X# p* s7 I& ~4 d! i8 w3 L
2 S- P( i, y3 w4 Y: W( I+ n
非常感谢，解释的很清楚，明白问题在哪里了。我们现在能达到30-40%，如何能提高到70%？

momoenn

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5 i- t2 s' Y9 o  G0 A# y, h/ C5 R" u+ \) l
你这个变化就是对的

地球外世界

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0 H! l5 W' K" s* [: j5 o9 {: N' y/ Y
5 j$ p, a- i$ T- f5 g) q变化，能详细描述一下你那里的实验培养情况吗？
  r+ H% D+ b, u: @3 N1 }4 R

wuhuaguo88l

刚开始几天，细胞集落会比较小，也比较少，大概在第三天后，细胞会变大变多；四五天后，根据培养基颜色可适当扩瓶培养。

momoenn

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# P+ W3 F$ Q  ~$ q8 i* b  q5 N  y, W* A0 o% ^* F+ p: ?# F9 k3 |# d
我们CD3+比例很高，但是CD56+比例很低，基本在3%左右，大约可能是什么原因导致的呢？谢谢

momoenn

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+ I( u& H$ z0 r$ U
分离当天算1天，第1-3天贴壁细胞较多，第3天开始，细胞开始慢慢成簇，少量抱团，这时形态变化也开始体现，开始出现梭状或者角状的细胞，到第5-7天，细胞抱团达到顶峰，梭状或角状细胞也越来越多，慢慢地细胞开始散开，单个细胞越来越多。

zhengjianwei521

这个你自己显微镜下看看吧，说不好啊，就是数量形态的变化

ganggangtry100

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; }7 B; `1 K; [, P   不知道你用的因子，培养基和样本来源和具体培养的方法，不好直接给你出办法。  k. {6 Q$ g6 G/ f
   现在CIK培养体系已经很成熟了，在网上搜集一下CIK培养方法，会有很详细的因子量的使用和培养基使用的，或者就用Schmidt Wolf 91年建立的经典的CIK培养方式，虽然有点老，但很不错，第0d，加入1000U/ml的人rIFN-γ，24h后，加入50ng/ml抗CD3和其他因子。每3d补充IL-2和新鲜培养基就可以。21天NKT 差的也得到20%了 " t! A, T8 }( v6 ]- M& c! V, ^9 B