CIK细胞培养0、4、7、10、14天分别是什么样的？

momoenn

回复 ganggangtry100 的帖子
2 P1 w5 t  a7 c6 O8 L! v2 V8 r5 c/ F. k+ m5 C, _8 v  R3 U, d- C
我们用的X-VIVO15  加的因子是IFN-r ，CD3和IL-2。加培养基是看细胞状态加。有没有可能是我们的因子效价不够呢

ganggangtry100

回复 momoenn 的帖子9 Q1 n2 S3 K4 o; C! p, u
; a% e" l* k" k+ H- Q( H( N
X-VIVO15  很好的培养基，你们CD3+细胞比较多，CD3抗体应该没有问题，看看IL-2和IFN-r在因子配置、保存上是否有失活（配置浓缩液-20度保存，平时工作液4度存放）可以尝试提高浓度或者三种因子一直添加，如果NKT还上不去，不要犹豫，换因子厂家吧~~~

momoenn

- x5 S+ x- E+ ?$ [3 L
% A  L! Q/ G; J: g5 {回复 ganggangtry100 的帖子* _$ w- g" X: z' d7 E8 I0 k
& e* e7 ^5 b' Z" z' L6 D0 S/ ~
IL-2失活的可能性很小，IFN-r和你说的保存方法一样。IFN-r一直添加的话，不会对细胞造成杀伤吗？如果可以的话，能不能试下请教一下.先谢下了

地球外世界

回复 wuhuaguo88l 的帖子
  }$ U! p2 w4 _. _
- \1 K. K( C, D7 N: X谢谢

地球外世界

回复 momoenn 的帖子
5 y. ^4 Q! ]2 M6 w7 v) J, W* J, V' J" j7 f  {. t' E; a% T
非常感谢，培养阶段描述很详细，我再好好观察记录，观察是否与您的结果映照。

地球外世界

回复 zhengjianwei521 的帖子! E4 h  Q: j1 N4 |6 Z6 D
1 Z' s, O3 Y# U: m* l7 [2 V* y
嗯，好的
6 n. I1 A4 \; x& _1 |9 @4 n

地球外世界

回复 ganggangtry100 的帖子  P) S4 ~% n4 z/ Z2 M/ Q8 k6 E% }
; ~9 V$ }' p4 j, c+ i, L- L
嗯，好的，现在用的是GT551培养基，用至少提前一天CD3和其他因子先包被培养瓶，再进行细胞培养，后期补加白细胞介素。这样培养，细胞增殖还是很慢，还在找原因。您觉得问题会出现在哪里呢？

ganggangtry100

回复 地球外世界 的帖子
5 [/ k6 u- c5 N5 p+ q& j# w& \+ z& o/ o
  CIK培养基中如果细胞生长慢，主要关注CD3和 IL-2的问题，他们两个是刺激细胞活化和和增殖作用，rIFN-γ等主要是增加细胞杀生活性的。
  B& Z1 A5 M- w' m1 ^1 o   看看包被浓度和白细胞介素的量是否够或失活，如果足量，只要他们两个因子，用1640细胞都能很好的增殖。

ganggangtry100

回复 momoenn 的帖子4 N( K# |6 q& W3 ~% Q5 S" L
* u) U, w. Q; X7 {6 S  d0 X
  CIK培养基中如果细胞生长慢，主要关注CD3和 IL-2的问题，他们两个是刺激细胞活化和和增殖作用，rIFN-γ等主要是增加细胞杀瘤活性的。
! {2 k/ N6 T. T1 D) k  {: F2 M   CIK本身也可以分泌rIFN-γ，个人认为不会对细胞造成不良影响。只是我的建议，各个实验室都有不同的培养方案，可以尝试一下。

地球外世界

回复 ganggangtry100 的帖子- n4 B0 F" s/ ?  m8 U7 i

" L/ i, B4 B8 p嗯，非常感谢，我调节一下，试试