CIK细胞培养0、4、7、10、14天分别是什么样的？

本心

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$ j1 Y+ l# ?/ Z! k6 e- P2 v0 [8 s
+ l: D/ o! \5 [) B可以在D7加

ganggangtry100

CIK细胞培养0、4、7、10、14天分别是什么样的？？. O0 J  k, R) p3 Q0 v
个人觉得应该从两方面来说：# `  T0 M2 K' m4 u1 a
1、细胞形态的改变
1 M8 F5 \( q  u6 t/ B+ h      红细胞、单核细胞等杂志逐渐减少，细胞由圆形变成不规则较长细胞
8 ^+ `; D6 ~$ ~/ y3 y2、从细胞表型上
$ K! m4 \4 r' x0 e) C5 C5 w* Z    随着抗体CD3的加入，培养中的CIK细胞的 CD3+细胞会从起始的20-30% 很快变为 90%以上，由于IL-2、干扰素等因子的加入，CIK的主要效应细胞CD3+CD56+细胞也会从原来的1%左右慢慢变为30-70%左右。
7 M+ \( e3 `/ @8 O   概括起来，CIK从原来0天的红细胞、粒细胞、单核细胞、淋巴细胞等一群复合细胞，变为以CD3+为主的一群异质细胞。
! V& H( j* e, ^7 \: f. E8 k7 I   

地球外世界

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: U- u4 \/ M1 ~1 h, D
( I/ s' S" u" ~, F, F6 Z* N非常感谢，解释的很清楚，明白问题在哪里了。我们现在能达到30-40%，如何能提高到70%？

momoenn

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# @1 m! Q6 O" K6 X- S: }: @; \# q你这个变化就是对的

地球外世界

回复 momoenn 的帖子) }+ E7 \; Y4 v$ b  I$ s

0 w' ?/ _$ I0 D变化，能详细描述一下你那里的实验培养情况吗？
2 F, X! \9 p+ Z+ q

wuhuaguo88l

刚开始几天，细胞集落会比较小，也比较少，大概在第三天后，细胞会变大变多；四五天后，根据培养基颜色可适当扩瓶培养。

momoenn

回复 ganggangtry100 的帖子" d, `9 ]" w4 P/ h# b
5 h5 C2 {1 i# ^; k3 p4 y
我们CD3+比例很高，但是CD56+比例很低，基本在3%左右，大约可能是什么原因导致的呢？谢谢

momoenn

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. Z# w! j5 H0 ?2 _& ?* B
/ p( u6 o3 q+ T' d/ X分离当天算1天，第1-3天贴壁细胞较多，第3天开始，细胞开始慢慢成簇，少量抱团，这时形态变化也开始体现，开始出现梭状或者角状的细胞，到第5-7天，细胞抱团达到顶峰，梭状或角状细胞也越来越多，慢慢地细胞开始散开，单个细胞越来越多。

zhengjianwei521

这个你自己显微镜下看看吧，说不好啊，就是数量形态的变化

ganggangtry100

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5 Z% X4 T; ~. c, U% r: q( d6 N
( `2 D2 i5 h9 i8 O   不知道你用的因子，培养基和样本来源和具体培养的方法，不好直接给你出办法。+ K7 r0 o. U) d2 a: P3 ~5 K9 J
   现在CIK培养体系已经很成熟了，在网上搜集一下CIK培养方法，会有很详细的因子量的使用和培养基使用的，或者就用Schmidt Wolf 91年建立的经典的CIK培养方式，虽然有点老，但很不错，第0d，加入1000U/ml的人rIFN-γ，24h后，加入50ng/ml抗CD3和其他因子。每3d补充IL-2和新鲜培养基就可以。21天NKT 差的也得到20%了 1 _, J6 ]5 _+ R2 C$ W